Klíčový rozdíl mezi HPLC a UPLC je v tom, že HPLC umožňuje analýzu částic o velikosti kolem 5 mikrometrů, zatímco UPLC umožňuje mnohem menší částice kolem 2 mikrometrů.
HPLC a UPLC jsou obě techniky kapalinové chromatografie, které jsou užitečné při separaci složek sloučeniny. Abychom poznali rozdíl mezi HPLC a UPLC, musíme nejprve vědět, co je to HPLC. Je to proto, že UPLC je speciální verze HPLC a můžeme ji snadno pochopit, pokud víme, co je HPLC.
Co je to HPLC?
Pojem HPLC znamená High Performance Liquid Chromatography. Je to technika, kterou můžeme použít k oddělení různých složek sloučeniny. Je to také nejrozšířenější technika k identifikaci, kvantifikaci a oddělení složek směsi. Kromě toho tato technika používá vysoký tlak k protlačování rozpouštědel kolonou. Kromě toho jsou hlavní aplikace HPLC v biochemii pro analýzu složek sloučeniny. Je to ideální způsob pro separaci a identifikaci aminokyselin, nukleových kyselin, proteinů, uhlovodíků, pesticidů, sacharidů, antibiotik, steroidů a bezpočtu dalších anorganických látek.
Obrázek 01: Systém HPLC v laboratoři
Stručně řečeno, způsob fungování techniky HPLC je následující. Nejprve bychom měli zavést vzorek do proudu mobilní fáze v malých malých množstvích pomocí čerpadla. Tlak čerpadla by měl být udržován na 40 MPa. Poté tento proud mobilní fáze prosakuje přes kolonu HPLC. Také složky ve vzorku procházejí kolonou. Jejich rychlosti pohybu se však navzájem liší. Tento rozdíl vzniká v důsledku rozdílu v interakcích mezi složkami vzorku a adsorbentem uvnitř kolony. Tento adsorbent nazýváme stacionární fáze, protože se nachází uvnitř kolony (nepohybuje se). Za druhé, na konci kolony můžeme odebrat vzorek, který se z kolony vymývá. Tam můžeme určit rozdíly v retenčních časech pro každou složku ve vzorku.
Co je UPLC?
Pojem UPLC je zkratkou pro ultra vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii. Je to varianta HPLC, ale způsob fungování je stejný. Na rozdíl od HPLC však tato metoda umožňuje analyzovat velmi malé částice, jako jsou malé částice o velikosti 2 mikrometry.
Obrázek 02: Zařízení UPLC
Navíc poskytuje rychlejší analýzu. Při této technice používáme pro vložení vzorku do kolony tlak čerpadla 100 MPa. Tento vysoký tlak tedy potvrzuje, že celý vzorek je zaveden do kolony. To je tedy velmi účinné ve srovnání s HPLC.
Jaký je rozdíl mezi HPLC a UPLC?
Pojem HPLC znamená High Performance Liquid Chromatography, zatímco termín UPLC znamená Ultra High Performance Liquid Chromatography. Proto je technika UPLC vyvinutou verzí HPLC. Způsob operace je tedy pro obě techniky stejný. UPLC je však ve srovnání s HPLC účinnější, protože využívá vysoký tlak čerpadla; tlak čerpadla pro HPLC je 40 MPA, zatímco pro UPLC je 100 MPa. Jedná se tedy o rozdíl mezi HPLC a UPLC. Klíčovým rozdílem mezi HPLC a UPLC je především to, že HPLC umožňuje analýzu částic o velikosti kolem 5 mikrometrů, zatímco UPLC umožňuje mnohem menší částice kolem 2 mikrometrů.
Shrnutí – HPLC vs UPLC
UPLC je forma HPLC. Operační metody jsou tedy stejné. Ale můžeme najít některé vylepšené funkce v UPLC ve srovnání s HPLC. Proto existuje určitý rozdíl mezi HPLC a UPLC. Klíčovým rozdílem mezi HPLC a UPLC je však to, že HPLC umožňuje analýzu částic o velikosti kolem 5 mikrometrů, zatímco UPLC umožňuje mnohem menší částice kolem 2 mikrometrů.
