Klíčový rozdíl mezi HPLC a rychlou HPLC je v tom, že tlak čerpadla, který používáme pro HPLC, je kolem 40 MPa, zatímco tlak čerpadla pro rychlou HPLC je kolem 3-5 MPa.
Nejběžnější technikou, kterou používáme pro separaci složek směsi, je „kapalinová chromatografie“. Existuje několik technik k dosažení tohoto účelu, z nichž je HPLC velmi populární. HPLC je zkratka pro High Performance Liquid Chromatography, která identifikuje, kvantifikuje a separuje složky kapalné směsi rychlým a účinným způsobem. Rychlá HPLC je speciální aplikace HPLC, která v poslední době upoutala pozornost těch, kteří se zabývají studiem roztoků.
Co je to HPLC?
HPLC je vysoce výkonná kapalinová chromatografie. Využívá vysokého tlaku k tlačení rozpouštědel tak, aby prošla kolonou. Je to také ideální způsob, jak separovat a studovat různé sloučeniny, jako jsou aminokyseliny, nukleové kyseliny, sacharidy, steroidy, antibiotika a uhlovodíky. HPLC má mnoho výhod oproti jiným metodám separace směsí, jako je vyšší rozlišení a rychlejší analýza. Odstraňuje potřebu přebalování a regenerace a nabízí lepší kontrolu nad parametry a tím zvyšuje účinnost separace. V ideálním případě se HPLC hodí pro aplikace ve velkém měřítku, protože dokáže oddělit velmi malé částice a umožňuje použití vysokých tlaků, které usnadňují rozpouštění rozpouštědel.
Obrázek 01: Sloupec HPLC
Stručně řečeno, způsob fungování techniky HPLC je následující. Nejprve bychom měli zavést vzorek do proudu mobilní fáze v malých malých množstvích pomocí čerpadla. Tlak čerpadla by měl být udržován na 40 MPa. Tento proud mobilní fáze prosakuje přes kolonu HPLC. Poté složky ve vzorku také projdou kolonou. Jejich rychlosti pohybu se však navzájem liší kvůli rozdílu v interakcích mezi složkami vzorku a adsorbentem uvnitř kolony. Tento adsorbent nazýváme stacionární fáze, protože se nachází uvnitř kolony (nepohybuje se). Poté, na konci kolony, můžeme odebrat vzorek, který se eluuje z kolony, čímž můžeme shromáždit složky ve vzorku odděleně.
Co je rychlá HPLC?
Vědci z výzkumného ústavu Schering Plow nedávno vyvinuli rychlou HPLC techniku, která je pokročilou verzí HPLC, protože umožňuje ještě rychlejší separaci sloučenin ze směsi. Tato technika, známá také jako rychlá HPLC, využívá 2,7um tavené jádrové částice oxidu křemičitého, které jsou vyrobeny tavením 0,5um porézního oxidu křemičitého na pevné částice oxidu křemičitého. Tyto jedinečně vyrobené částice činí proces separace velmi rychlým, a to i při nízkém protitlaku, než jaký používáme v HPLC.
Obrázek 02: Zařízení FPLC
Rychlá HPLC poskytuje výsledky srovnatelné s UPLC, ale vědci se domnívají, že tato technika je lepší, protože nevyžaduje velmi drahé ultravysokotlaké zařízení. Skvělé je, že rychlá HPLC nevyžaduje žádné nové laboratorní protokoly.
Jaký je rozdíl mezi HPLC a Fast HPLC?
HPLC je vysoce výkonná kapalinová chromatografie a rychlá HPLC je pokročilá forma vysoce výkonné kapalinové chromatografie. Klíčový rozdíl mezi HPLC a rychlou HPLC je v tom, že tlak čerpadla, který používáme pro HPLC, je kolem 40 MPa. Zatímco tlak čerpadla pro rychlou HPLC je kolem 3-5 MPa. Kromě toho můžeme pomocí techniky HPLC separovat různé sloučeniny, jako jsou aminokyseliny, nukleové kyseliny, sacharidy, steroidy, antibiotika a uhlovodíky, zatímco technika rychlé HPLC se používá hlavně pro separaci proteinů.
Níže uvedená infografika představuje více informací o rozdílu mezi HPLC a rychlou HPLC.
Shrnutí – HPLC vs rychlá HPLC
HPLC je technika kapalinové chromatografie, která se stala velmi populární po celém světě. Fast HPLC je nová verze HPLC, vědci z Schering Plow Institute vyvinuli tuto novou techniku. Klíčový rozdíl mezi HPLC a rychlou HPLC spočívá v tlaku čerpadla, který používáme pro separaci. To jest; tlak čerpadla, který používáme pro HPLC, je kolem 40 MPa. Ale tlak čerpadla pro rychlou HPLC je kolem 3-5 MPa.
