Klíčový rozdíl – Protein A vs Protein G
Čištění protilátek IgG, jejich podtříd a dalších typů imunoglobulinů (IgA, IgE, IgD a IgM) se běžně provádí pomocí bakteriálních proteinů, které mají vysokou afinitu k Fc oblasti těchto protilátek. Protein A a Protein G jsou bakteriální rekombinantní proteiny, které jsou vysoce doporučovány pro účely purifikace lidských a jiných zvířecích IgG imunoglobulinů. A také protein A, protein G, protein A/G a protein L jsou nativní mikrobiální rekombinantní proteiny, které mají specifická vazebná místa pro Fc oblast savčích IgG protilátek. Kromě toho mohou být tyto mikrobiální proteiny také použity k čištění jiných typů imunoglobulinů, jako jsou IgA, IgE, IgD a IgM u savců a jiných zvířat, jako jsou králíci, myš, ovce, kráva atd. Protein A se váže na jiné lidské protilátky než IgG protilátka. Ale slabě se váže na podtřídu lidského IgG3a neváže se na lidskou protilátku IgD. Protein G se váže se všemi podtypy lidských IgG protilátek a je univerzálnější při vazbě na IgG protilátky jiných druhů. Protein G se však neváže na jiné typy lidských protilátek než IgG. Protein G má vyšší afinitu k IgG než protein A. To je klíčový rozdíl mezi proteinem A a proteinem G.
Co je to protein A?
Protein A je definován jako povrchový protein o velikosti 42 kDa. Protein A se původně nachází v buněčné stěně Staphylococcus aureus. Je zakódován „spa“genem. Protein A je regulován topologií DNA, buněčnou osmolaritou a dvousložkovým systémem. Tento mikrobiální rekombinantní protein je vysoce zapojen do biochemických reakcí, protože je schopen vázat se na několik typů protilátek, jako jsou IgG, IgA, IgE a IgM. Tento mikrobiální protein se tedy používá k čištění typů lidských protilátek. Má pět homologních vazebných domén „Ig“, které se skládají do tříšroubovicových svazků. Každá doména je schopná vázat se na imunoglobulinové proteiny z mnoha druhů savců, zejména s IgG protilátkami. Protein A se specificky váže na těžký řetězec Fc oblasti většiny imunoglobulinů.
Pokud jde o lidské proteiny rodiny VH3, protein A se váže na oblast Fab. Rekombinantní protein A je širší ve své schopnosti vázat se na jiné lidské protilátky (IgA, IgE, IgM) jiné než IgG protilátky. Ale slabě se váže na podtřídu lidského IgG3a neváže se na lidskou protilátku IgD. Protein A je také schopný vázat se na IgG protilátky jiných druhů, jako je kůň, králík, myš, pes, opice, kráva atd.
Obrázek 01: Protein A
Protein A hraje klíčovou roli v patogenezi Staphylococcus aureus. Tento protein usnadňuje vazbu bakterií na povrch potažený lidským Von–Willebrandovým faktorem. Zvyšuje tak účinnost bakteriální infekce. Protein A také ochromuje lidskou humorálně zprostředkovanou imunitu. Tento mikrobiální rekombinantní protein se vyrábí procesem průmyslové fermentace.
Co je to protein G?
Protein G je definován jako protein vázající imunoglobulin, který je specificky exprimován streptokokovými bakteriemi skupiny C a D. Má vysokou afinitu k Fc a Fab oblastem protilátek. Protein G má molekulovou velikost přibližně 65 kDa.
Protein G je povrchový protein. Vzhledem ke své vazebné afinitě k imunoglobulinům se používá k čištění protilátek. Protein G se váže se všemi podtypy lidských IgG protilátek a je univerzálnější, když se váže i na IgG protilátky jiných druhů. Neváže se však na jiné typy lidských protilátek (IgA, IgE, IgM, IgD). Vzájemné skládání domén proteinu G – B1 vede ke vzniku globulárního proteinu.
Jaké jsou podobnosti mezi proteinem A a proteinem G?
- Oba jsou mikrobiální proteiny.
- Oba jsou rekombinantní proteiny.
- Oba proteiny mají vysokou afinitu k lidské IgG protilátce a jejím podtřídám.
- Oba se používají k čištění imunoglobulinů.
- Oba proteiny se mohou vázat na Fc oblast imunoglobulinů.
Jaký je rozdíl mezi proteinem A a proteinem G?
Protein A vs Protein G |
|
| Protein A je definován jako povrchový protein o velikosti 42 kDa, který se původně nachází v buněčné stěně Staphylococcus aureus. | Protein G je definován jako povrchový protein vázající imunoglobulin o velikosti 65 kDa, který je specificky exprimován streptokokovými bakteriemi skupiny C a D. |
| Vyjadřující typ bakterie | |
| Protein A je exprimován Staphylococcus aureus | Protein G je exprimován streptokokovými bakteriemi skupiny C a D. |
| Molekulární velikost | |
| Protein A má velikost 42 kDa. | Protein G má velikost přibližně 65 kDa (protein G148 G-65 kDa a protein C40 G-58 kDa). |
| Vazba na lidský sérový albumin | |
| Protein A se neváže na sérový albumin. | Protein G má vazebná místa pro sérový albumin. |
| Purifikace lidského IgG3 Podtřída | |
| Protein A nelze použít k čištění podtřídy lidského IgG3, protože se neváže na podtřídu lidského imunoglobulinu IgG3. | Protein G lze použít k čištění podtřídy lidského IgG3, protože se váže na podtřídu lidského imunoglobulinu IgG3. |
| Přečištění jiných lidských protilátek (IgA, IgE a IgM) | |
| Protein A má vyšší schopnost vázat se na jiné lidské protilátky jiné než IgG protilátky. Takže může být použit k čištění jiných lidských protilátek, jako je; IgA, IgE a IgM. | Protein G se váže se všemi podtypy lidských IgG protilátek. Ale protein G se neváže na jiné lidské protilátky jako; IgA, IgE a IgM. Nelze jej tedy použít k čištění jiných lidských protilátek, jako jsou; IgA, IgE a IgM |
Shrnutí – Protein A vs Protein G
Mikrobiální rekombinantní protein A, protein G, protein A/G a protein L jsou nativní bakteriální proteiny, které mají specifická vazebná místa pro Fc oblast savčích IgG protilátek. Protein A a protein G mají také vazebná místa pro další IgG protilátky jiných druhů. Protein A a protein G jsou bakteriální rekombinantní proteiny, které jsou vysoce doporučovány pro účely purifikace lidských a jiných zvířecích IgG imunoglobulinů. Protein L má vysokou afinitu ke kappa lehkým řetězcům imunoglobulinových tříd IgG, IgA a IgM. Takže protein L může být začleněn k čištění těchto typů imunoglobulinů u lidí a jiných druhů. Průmyslově se všechny tyto bakteriální proteiny v současnosti používají k čištění imunoglobulinů, jako jsou; IgG, IgA, IgD, IgE a IgM. To lze popsat jako rozdíl mezi proteinem A a proteinem G.
Stáhněte si PDF verzi Protein A vs Protein G
Můžete si stáhnout PDF verzi tohoto článku a použít ji pro offline účely podle citace. Stáhněte si PDF verzi zde Rozdíl mezi proteinem A a proteinem G
