Klíčový rozdíl mezi Elisou a western blotem je v tom, že Elisa nebo enzymová imunoanalýza je diagnostický nástroj, který zjišťuje, zda byl pacient vystaven konkrétnímu typu viru nebo jinému infekčnímu agens, zatímco western blot je technika, která detekuje specifický protein ze vzorku proteinu.
AIDS se stal celosvětovým problémem a výskyt této smrtelné nemoci se v posledních několika desetiletích znepokojivě zvýšil. Testy HIV zjišťují přítomnost viru lidské imunodeficience (HIV), který tento syndrom způsobuje. Z různých testů na HIV jsou dnes velmi populární ELISA a Western Blot. ELISA je zkratka pro enzyme-linked immunosorbent assay, což je testovací technika založená na destičkách. Jde o enzymový imunotest používaný k detekci protilátek proti HIV. Western blot detekuje specifický protein z proteinové směsi pomocí značené protilátky.
Klíčový rozdíl
1. Přehled a hlavní rozdíl
2. Co je Elisa
3. Co je to Western Blot
4. Podobnosti mezi Elisou a Western Blot
5. Srovnání vedle sebe – Elisa vs Western Blot v tabulkové formě
6. Shrnutí
Co je Elisa?
ELISA, což je zkratka pro enzyme-linked immunosorbent assay, byl první test určený primárně pro detekci HIV. Jedná se o deskový test. Používá se k detekci protilátek proti HIV a tento test vykazuje vysokou citlivost. Při této technice se antigeny ve vzorku vážou s imobilizovanými protilátkami na pevném povrchu. Jakmile jsou antigeny imobilizovány, tvoří komplexy s protilátkami spojenými s enzymy. Poté se tyto konjugované enzymy inkubují s příslušným substrátem.
Obrázek 01: ELISA
Reakce enzym-substrát vytváří měřitelný barevný produkt. Měřením množství produktu lze kvantifikovat počet antigenů přítomných ve vzorku. Proto je ELISA velmi specifická a sofistikovaná technika, která vyžaduje pozornost dobře kvalifikovaných techniků. Je to také časově náročný proces s požadavkem pokročilého vybavení.
Co je Western Blot?
Western blotting je technika, která umožňuje detekci specifického proteinu z proteinové směsi. Western blot je membrána používaná během blotovacího postupu k získání zrcadlového obrazu proteinových vzorů v SDS-polyakrylamidovém gelu. Membrána používaná pro western blotting je většinou tvořena nitrocelulózou nebo polyvinylidendifluoridem (PVDF). Membrána s přeneseným proteinem může být použita k identifikaci konkrétního proteinu. Pro detekci požadovaného proteinu pomocí hybridizace je nutná vysoce kvalitní protilátka. Protilátka se naváže se svým specifickým antigenem a odhalí přítomnost požadovaného antigenu, kterým je protein.
Obrázek 02: Western Blot
Přenos proteinů z SDS polyakrylamidového gelu na western blot se provádí elektroblotováním. Je to efektivní a rychlá metoda, která způsobí, že proteiny elektroforézou z gelu přejdou na nitrocelulózovou membránu (western blot).
Western blotting je užitečný při detekci anti-HIV protilátek ve vzorku lidského séra. Western blot lze také použít jako potvrzující test na infekci hepatitidou B a definitivní test na nemoc šílených krav.
Jaké jsou podobnosti mezi Elisou a Western Blot?
- Elisa a western blot jsou dva typy technik používaných k diagnostice HIV.
- Obě metody jsou založeny na imunodetekci.
- Jsou založeny na tvorbě komplexu protilátka-protein.
- Obě metody mohou analyzovat proteiny.
- Elisa a western blotting jsou časově náročné techniky.
- K provádění těchto technik je zapotřebí dobře vyškolený a kvalifikovaný personál.
Jaký je rozdíl mezi Elisou a Western Blot?
ELISA je velmi citlivá a velmi sofistikovaná metoda, která detekuje přítomnost antigenu a protilátky v krvi pacienta, zatímco western blot je technika, která detekuje specifický protein z proteinové směsi. Toto je klíčový rozdíl mezi Elisou a Western blotem. Elisa je kvalitativní i kvantitativní. Naproti tomu western blot je kvalitativní. Někdy je semikvantitativní. Když vezmeme v úvahu čas potřebný na test, Elisa test je časově náročný, zatímco Western blot je časově náročnější než Elisa.
Níže uvedená infografika shrnuje rozdíl mezi Elisou a western blotem.
Shrnutí – Elisa vs Western Blot
ELISA je velmi citlivá a velmi sofistikovaná metoda, která zjišťuje přítomnost antigenu a protilátky v naší krvi. Na druhé straně je technika Western blotting vyvinuta k identifikaci specifického proteinu z proteinové směsi. Toto je klíčový rozdíl mezi Elisou a Western blotem. ELISA byl první test určený k detekci HIV. K potvrzení výsledků testu ELISA lze použít Western blot. Jak ELISA, tak Western Blot jsou považovány za nepřímé metody pro detekci HIV.
