Klíčový rozdíl – primární buněčná kultura a buněčná linie
Pole výzkumu nabrala zásadní obrat se zavedením kultivace buněk a používáním buněčných linií pro výzkum. Na uměle připravených buňkách a buněčných liniích se provádějí různé testy, aby se vyhodnotilo chování buňky. Většina výzkumu založeného na lidech vyžaduje kultivaci buněk a buněčných linií k ověření výsledků, zejména pokud jsou výzkumné studie založeny na farmakologii a objevu léků. Primární buněčná kultura je kultura připravená přímou izolací buněk mechanickými nebo enzymatickými metodami. Buněčná linie se připravuje kontinuálním pasážováním primární buněčné kultury, aby se získala buněčná linie, která získala homologní znaky. Klíčovým rozdílem mezi primární buněčnou kulturou a buněčnou linií je počet pasáží, které každá z nich má. Primární buněčná kultura se izoluje přímo, zatímco buněčná linie se připravuje několikanásobným pasážováním primární buněčné kultury.
Co je primární buněčná kultura?
Primární buněčná kultura je příprava buněčné kultury izolováním buněk přímo ze zdroje mechanickými nebo enzymatickými metodami. Buňky se izolují trypsinizačními nebo netrypsinizačními metodami. Primární buněčné kultury se pěstují ve vhodném růstovém médiu, které obsahuje růstové faktory, hormony, lipidy a další nedefinované složky. Některá média musí být doprovázena sérem. Média zajišťují, že podmínky pro růst jsou optimalizovány a buňky přežívají za optimálních podmínek. Buňky lze izolovat z různých tkáňových zdrojů, jako je jaterní tkáň, endotel a nervová tkáň u lidí nebo vyšších zvířat pomocí trypsinizace.
Při izolaci buněk z rostlin a mikroorganismů se používají speciální extrakční postupy, které využívají jak mechanické, tak chemické metody. Tyto izolované buňky mohou být imobilizovány na pevném nosiči nebo mohou být pasážovány po několik generací, aby se vyvinuly do buněčné linie.
Primární buněčné kultury jsou převážně dvou typů; Adherentní buněčné kultury a suspenzní buněčné kultury. Adherentní primární buněčné kultury jsou závislé na ukotvení a pro růst vyžadují pevnou podporu. Adherentní primární buněčné kultury pocházejí hlavně z tkání nebo orgánů. Suspenzní primární buněčné kultury jsou nezávislé na ukotvení a rostou v kapalném médiu. Suspenzní kultury by měly být během růstové fáze nepřetržitě míchány. Suspenzní primární buněčné kultury lze přímo získat z krve.
Primární buněčné kultury mají relativně kratší životnost, ale informace získané z primárních buněčných kultur v podmínkách in vitro poskytují základní základ pro mnoho studií. Jsou užitečné pro studium charakteristik buněk, jak morfologického, tak chemického chování.
Co je to buněčná linie?
Buněčné linie jsou široce používány ve výzkumu a v současnosti jsou pro výzkumné účely komerčně dostupné buněčné linie, jako jsou rakovinné buněčné linie, jaterní buněčné linie a ledvinové buněčné linie. Buněčné linie se připravují kontinuálním pasážováním primární buněčné kultury. Pasáž odkazuje na proces subkultivace, kdy se buněčné kultury vyvinou do buněčné linie. Tyto buněčné linie jsou kultury ve dvourozměrných nebo trojrozměrných matricích a udržované jako buněčné linie.
Buněčné linie jsou klasifikovány jako konečné a spojité buněčné linie. Konečné buněčné linie jsou podrobeny určitému počtu pasáží (20 – 30 pasáží). Po dokončení požadovaného počtu pasáží přechází buněčná linie do stadia stárnutí. S těmito buňkami se snadno manipuluje, protože jejich růst je definitivní. Kontinuální buněčné linie se také označují jako imortalizované buněčné linie. Tyto buněčné linie nemají určitý počet pasáží. Rostou donekonečna, a tak jsou schopny získávat mutace. Kontinuální buněčné linie proto snadno mutují, a proto se mění jejich morfologické a genetické charakteristiky, na rozdíl od konečných buněčných linií.
Obrázek 01: Buňka
Buněčné linie se používají, protože je to pohodlnější než použití primární buněčné kultury, protože ji lze používat znovu a znovu po určitou dobu. Ale je náchylnější k mutacím a kontaminacím, protože jejich proliferace se zvyšuje.
Jaké jsou podobnosti mezi primární buněčnou kulturou a buněčnou linií?
- Typy buněk buněčné kultury i buněčné linie se používají ve výzkumu ke studiu morfologických, chemických a genetických charakteristik buňky.
- Buněčné kultury i typy buněk buněčné linie jsou extrahovány mechanickými a enzymatickými metodami.
- Typy buněk buněčné kultury i buněčné linie vyžadují růstové médium a specifické podmínky růstu.
- Buněčné kultury i buněčné linie jsou náchylné k mutacím.
Jaký je rozdíl mezi primární buněčnou kulturou a buněčnou linií?
Primární buněčná kultura vs. buněčná linie |
|
| Primární buněčná kultura je kultura připravená přímou izolací buněk mechanickými nebo enzymatickými metodami. | Buněčná linie se připravuje kontinuálním pasážováním primární buněčné kultury, aby se získala buněčná linie, která získala homologní znaky. |
| Počet průchodů | |
| Primární buněčné kultury nejsou pasážovány, buňky jsou udržovány v kultivačních podmínkách. | Při vytváření buněčných linií jsou buňky pasážovány definitivně nebo neomezeně. |
| Typy | |
| Adherentní primární buněčná kultura a suspenzní primární buněčná kultura jsou dva typy primárních buněčných kultur. | Konečná buněčná linie a kontinuální buněčná linie jsou dva typy buněčných linií. |
| Životnost | |
| Primární buněčné kultury mají krátkou životnost. | Buněčné linky mají delší životnost. |
Shrnutí – Primární buněčná kultura vs. buněčná linie
Primární buněčné kultury a buněčné linie se široce používají ve výzkumu ke studiu vzorců chování různých buněk za různých podmínek a za různých farmakologických aspektů. Primární buněčné kultury jsou přímo izolovány ze zdrojového orgánu nebo tkáně a jsou pěstovány na kultivačním médiu. Podmínky jsou optimalizovány pro růst specifických buněk. Naproti tomu buněčné linie se připravují pasážováním primárních buněčných kultur konečný nebo nekonečný počet opakování. Buněčné linie jsou komerčně dostupné a jsou mezi výzkumníky oblíbené díky snadnému použití.
