Klíčový rozdíl mezi progresivním a regresivním barvením spočívá v tom, že při progresivním barvení je tkáň ponechána v barvícím roztoku jen tak dlouho, aby dosáhla požadovaného koncového bodu, zatímco při regresivním barvení je tkáň záměrně ponechána pro nadměrné barvení, dokud barvivo nasytí všechny tkáňové prvky a poté odbarví.
Barvení je technika, která zvýrazňuje a odlišuje složky tkáně a umožňuje je pozorovat pod mikroskopem. Barvení H a E je obecný postup barvení tkání, který se nejčastěji používá v histologii. Používá hematoxylin a eosin (kontrabarva). Nukleární barvení pomocí hematoxylinu může být provedeno progresivními nebo regresivními technikami barvení. Některé přípravky hematoxylinu se používají při progresivním barvení. Mayerův hematoxylin je jedním příkladem. Progresivní skvrny mají nízkou koncentraci hematoxylinu. Proto pomalu a selektivně barví chromatin. Některé další formulace se používají při regresivním barvení. Harris hematoxylin se používá při regresivním barvení. Regresivní skvrny mají vysokou koncentraci hematoxylinu; proto skvrna rychle difunduje po celé buňce.
Co je progresivní barvení?
Progresivní barvení je technika, která umožňuje tkáni v barvícím roztoku jen tak dlouho, aby dosáhla požadovaného koncového bodu. Proto je nutné časté sledování kvality barvení, aby se určilo dokončení barvení. Intenzita barvení je řízena dobou ponoření.
Obrázek 01: Struktura hematoxylinu
Gillův hematoxylin a Mayerův hematoxylin jsou progresivní povahy. Pro tyto dvě hematoxylingy se při progresivním barvení běžně používá doba barvení 5-10 minut. Obecně jsou progresivní hematoxyliny méně koncentrované. Proto pomalu a selektivně barví chromatin. Při progresivním barvení hematoxylin primárně barví chromatin na požadovanou intenzitu. K odstranění přebytečné skvrny tedy nevyžaduje diferenciaci ve zředěném kyselém alkoholu.
Co je regresivní barvení?
Regresivní barvení je rychlejší technika barvení, při které je tkáň záměrně přebarvena, dokud barvivo nenasytí všechny složky tkáně. Poté se tkáň selektivně odbarví, dokud nedosáhne správného koncového bodu. Krok odbarvení se nazývá diferenciace. Diferenciace se provádí k odstranění přebytečných skvrn. Obvykle se to provádí pomocí zředěného kyselého alkoholu.
Obrázek 02: Barvení H a E
Harris hematoxylin je populárně používaný typ hematoxylinu. Ehrlichovy a Delafieldovy hematoxyliny se také používají při regresivním barvení. Regresivní skvrny mají vysokou koncentraci hematoxylinu. Proto rychle difundují celou buňku a přebarvují chromatin a cytoplazmu. Regresivní barvení je preferováno, když je vyžadována velmi jasná diferenciace tkáňových prvků.
Jaké jsou podobnosti mezi progresivním a regresivním barvením?
- Progresivní a regresivní barvení jsou dva typy technik barvení.
- Oba používají barvivo zvané hematoxylin.
Jaký je rozdíl mezi progresivním a regresivním barvením?
Progresivní barvení je pomalejší proces barvení, při kterém je tkáň ponechána v barvicím roztoku jen tak dlouho, aby bylo dosaženo požadovaného koncového bodu. Naproti tomu regresivní barvení je rychlejší proces barvení, při kterém je tkáň záměrně přebarvena a poté odbarvena. Toto je klíčový rozdíl mezi progresivním a regresivním barvením.
Dalším významným rozdílem mezi progresivním a regresivním barvením je navíc to, že progresivní barvení nevyžaduje další krok zvaný diferenciace, zatímco regresivní barvení vyžaduje diferenciaci, aby se odstranily přebytečné skvrny. Kromě toho mají progresivní skvrny nízkou koncentraci hematoxylinů, zatímco regresivní skvrny mají vyšší koncentraci hematoxylinů.
Níže uvedená infografika uvádí další rozdíly mezi progresivním a regresivním barvením.
Shrnutí – progresivní vs regresivní barvení
Progresivní barvení je pomalá technika barvení, při které je tkáň ponechána v barvicím roztoku jen tak dlouho, aby dosáhla koncového bodu. Proto se nadměrné barvení neprovádí je progresivní barvení. Naproti tomu regresivní barvení je rychlejší technika barvení, při které je tkáň přebarvena a poté odbarvena. Progresivní barvení nevyžaduje diferenciaci (odstranění přebytečné skvrny), zatímco regresivní barvení vyžaduje diferenciaci ve zředěném kyselém alkoholu, aby se odstranila přebytečná skvrna. Progresivní skvrny mají obecně nízkou koncentraci hematoxylinů, zatímco regresivní skvrny mají vyšší koncentraci hematoxylinů. To shrnuje rozdíl mezi progresivním a regresivním barvením.
