Klíčový rozdíl mezi RIA a ELISA je v tom, že radioimunoanalýza (RIA) je technika imunoanalýzy, která využívá radioizotopy k detekci komplexů antigen-protilátka, zatímco enzymová imunoanalýza (ELISA) je technika imunoanalýzy, která k detekci antigenu využívá enzymy -komplexy protilátek.
Detekce specifických proteinů, jako jsou antigeny, je extrémně důležitá při diagnostice onemocnění. Proto jsou RIA a ELISA dvě imunoanalytické techniky používané v laboratořích k rychlé detekci specifických proteinů, zejména antigenů. Obecně se specifická protilátka váže na cílový antigen a tvoří viditelný komplex známý jako precipitin. Tyto komplexy protilátky a antigenu lze identifikovat různými technikami. Technika detekce komplexu antigen-protilátka pomocí radioizotopů je známá jako RIA a technika detekce komplexu antigen-protilátka pomocí enzymů je známá jako ELISA.
Co je RIA?
Radioimunoanalýza (RIA) je technika imunoanalýzy, která detekuje antigeny a komplexy protilátek pomocí radioizotopů. Rosalyn Sussman Yalow vyvinula tuto techniku v roce 1960 s pomocí Solomona Bersona. Za tento pozoruhodný objev získala Rosalyn Sussman Yalow v roce 1977 Nobelovu cenu za medicínu. Při radioimunoanalýze je známé množství antigenu nejprve radioaktivní. antigeny. Tyto radioizotopy se normálně vážou na tyrosinovou aminokyselinu antigenu. Poté je radioaktivně značený antigen smíchán s protilátkou. V důsledku toho se radioaktivně značený antigen a protilátka specificky vážou jedna na druhou.
Později se přidá vzorek séra, které obsahuje neznámé množství stejného antigenu. To způsobí, že neznačený antigen ze séra soutěží s radioaktivně značeným antigenem o vazebná místa protilátky. Jak se zvyšuje koncentrace neznačeného antigenu, více se ho váže na protilátku a vytlačuje radioaktivně značenou variantu. Snižuje tedy poměr radioaktivně značeného antigenu vázaného na protilátku k volnému radioaktivně značenému antigenu. Na konci postupu se navázané antigeny oddělí. Nakonec se radioaktivita volných antigenů ve zbývajícím supernatantu měří pomocí gama čítače.
Co je ELISA?
ELISA je technika imunotestu, která detekuje komplexy antigenů a protilátek pomocí enzymů. Jde o biochemický analytický test, který poprvé popsali Engvall a Perlmann v roce 1971. Ve většině jednoduchých forem technik ELISA jsou antigeny vzorku pacienta připojeny k pevnému povrchu. Poté se na povrch aplikuje odpovídající protilátka, aby se mohla vázat na antigen.
Obrázek 01: ELISA
Tato konkrétní protilátka je spojena s enzymem. Později jsou všechny nenavázané protilátky odstraněny promytím detergentem. V posledním kroku této techniky se přidá substrát enzymu. Pokud dojde ke správné vazbě antigenu a protilátky, následná reakce vytvoří detekovatelný barevný signál, nejčastěji změnu barvy.
Jaké jsou podobnosti mezi RIA a ELISA?
- RIA a ELISA jsou techniky imunotestů.
- Obě techniky vytvářejí antigen a protilátkový komplex.
- Tyto techniky lze použít k detekci neznámých proteinů ve vzorcích.
- Oba se používají při diagnostice nemocí v laboratořích.
- Obě jsou vysoce specifické a citlivé techniky.
Jaký je rozdíl mezi RIA a ELISA?
RIA je imunoanalytická technika pro detekci komplexu antigen-protilátka pomocí radioizotopů. ELISA je imunoanalytická technika pro detekci komplexu antigen-protilátka pomocí enzymů. Toto je klíčový rozdíl mezi RIA a ELISA. Navíc v technice RIA je antigen značen, ale v ELISA je značena protilátka. Navíc v technice RIA jsou značícími molekulami radioizotopy, zatímco v ELISA jsou značícími molekulami enzymy. To je další rozdíl mezi RIA a ELISA.
Níže uvedená infografika ukazuje další rozdíly mezi RIA a ELISA v tabulkové formě.
Shrnutí – RIA vs ELISA
Imunotesty hrají velmi důležitou roli v různých bioanalytických nastaveních, jako je klinická diagnostika, biofarmaceutická analýza, monitorování životního prostředí, biologická bezpečnost a testování potravin. Od 60. let 20. století byla vyvinuta široká škála imunoanalýz. RIA a ELISA jsou obě techniky imunotestů. RIA je imunoanalytická technika pro detekci komplexu antigen-protilátka pomocí radioizotopů. ELISA je imunoanalytická technika pro detekci komplexu antigen-protilátka pomocí enzymů. Toto je shrnutí rozdílu mezi RIA a ELISA.
