Klíčový rozdíl mezi HEK293 a HEK293t je v tom, že HEK293 je imortalizovaná buněčná linie odvozená z embryonální lidské ledviny, která je transfekována nastříhaným lidským adenovirem typu 5DNA, zatímco HEK293t je dceřiná buněčná linie odvozená z původní buněčné linie HEK293, která je transfekováno plazmidovým vektorem nesoucím počátek replikace SV40.
Transfekce je obvykle definována jako proces vnášení cizí DNA a RNA do buněk za účelem ovlivnění jejich genotypu a fenotypu. Takové zavedení cizích nukleových kyselin prostřednictvím různých biologických, chemických a fyzikálních metod může změnit vlastnosti buňky. V konečném důsledku to umožňuje studium funkce genu a exprese proteinu v kontextu buňky. HEK293 a HEK293t jsou dvě buněčné linie, které byly po mnoho let široce používány ve výzkumu buněčné biologie kvůli jejich sklonu k transfekci.
Co je HEK293?
HEK293 je imortalizovaná buněčná linie odvozená z embryonální lidské ledviny, která je transfekována seříznutým lidským adenovirem typu 5DNA za účelem produkce mnoha rekombinantních proteinů. HEK293 byly původně izolovány z buněk lidských ledvin holandským biologem Alexem Van der Ebem v roce 1973. Tyto buňky byly pěstovány v tkáňové kultuře plodu ženského pohlaví. Později byly transfekovány sestříhaným lidským adenovirem typu 5DNA Frankem Grahamem, postdoktorandem ve Van der Ebově laboratoři. Tato buněčná linie byla pojmenována HEK293, protože to byl Frankův experiment 293rd.
Obrázek 01: HEK293
Inkorporace adenovirových genů do genomu buňky HEK umožňuje těmto buňkám velmi efektivně produkovat velké množství rekombinantních proteinů. Navíc adenovirový vektor obsahuje oblast promotoru CMV; proto tuto účinnost dále zvyšuje. Tato buněčná linie byla použita jako hostitel pro studie genové exprese. Tato buněčná linie je také využívána biotechnologickým průmyslem k výrobě terapeutických proteinů pro genovou terapii.
Co je 293 HEK?
HEK293t je dceřiná buněčná linie odvozená z původní buněčné linie HEK293, která je transfekována plazmidovým vektorem nesoucím počátek replikace SV40 za účelem produkce vysokého množství rekombinantních proteinů. HEK293t je lidská buněčná linie, která exprimuje mutantní verzi velkého T antigenu SV40. HEK293t byl vytvořen v laboratoři Michele Carlosové ve Stanfordu prostřednictvím stabilní transfekce buněčné linie HEK29E plazmidem kódujícím teplotně citlivý mutant velkého T antigenu SV40. Původně byl označován jako 293/tsA1609neo. Je to proto, že transfekce použitá k vytvoření buněčné linie, která uděluje rezistenci na neomycin a expresi alely tsA 1609 velkého T antigenu SV40.
Obrázek 02: HEK293t
Vzhledem k expresi mutantní verze velkého T antigenu SV40 mohou transfekované plazmidy s počátkem replikace SV 40 výrazně zvýšit množství rekombinantního proteinu. Tato buněčná linie se běžně používá v biotechnologickém průmyslu pro expresi proteinů a produkci rekombinantních retrovirů.
Jaké jsou podobnosti mezi HEK293 a HEK293t?
- HEK293 a HEK293t jsou dvě buněčné linie, které byly široce používány ve výzkumu buněčné biologie kvůli jejich sklonu k transfekci.
- Obě buněčné linie jsou laboratorního původu.
- Tyto buněčné linie mohou výrazně zvýšit množství produkce rekombinantních proteinů.
- Vyrábějí se transfekcí embryonálních lidských ledvinových buněk plazmidovým vektorem.
Jaký je rozdíl mezi HEK293 a HEK293t?
HEK293 je imortalizovaná buněčná linie odvozená z embryonální lidské ledviny, která je transfekována seříznutým lidským adenovirem typu 5DNA. Naproti tomu HEK293t je dceřiná buněčná linie odvozená z původní buněčné linie HEK293, která je transfekována plazmidovým vektorem nesoucím počátek replikace SV40. Toto je klíčový rozdíl mezi HEK293 a HEK293t. Navíc HEK293 neexprimuje mutantní verzi velkého T antigenu SV40. Na druhé straně HEK293t exprimuje mutantní verzi velkého T antigenu SV40.
Následující infografika uvádí rozdíly mezi HEK293 a HEK293t v tabulkové formě pro srovnání vedle sebe.
Shrnutí – HEK293 vs. HEK293t
HEK293 a HEK293t jsou dvě buněčné linie, které byly široce používány ve výzkumu buněčné biologie kvůli jejich stabilnímu růstu a sklonu k transfekci. HEK293 je imortalizovaná buněčná linie odvozená z embryonální lidské ledviny, která je transfekována nastříhaným lidským adenovirem typu 5DNA, zatímco HEK293t je dceřiná buněčná linie odvozená z původní buněčné linie HEK293, která je transfekována plazmidovým vektorem nesoucím počátek replikace SV40. Toto shrnuje rozdíl mezi HEK293 a HEK293t.
