Klíčový rozdíl mezi pBR322 a pUC19 je ten, že pBR322 je plazmidový vektor o délce 4361 párů bazí, zatímco pUC19 je plazmidový vektor o délce 2686 párů bazí.
Klonovací vektor je malý kousek DNA, který lze v organismu udržovat stabilně. Je to také malý kousek DNA, do kterého lze vložit cizí fragment DNA pro účely klonování. Vektor obsahuje důležité vlastnosti, které umožňují pohodlnou inzerci cizího fragmentu DNA do vektorů, jako jsou restrikční místa, selektovatelný marker, reportérový gen a prvek exprese. Klonování bylo nejprve provedeno pomocí E.coli. Klonovací vektory pro E. coli zahrnují plazmidy, bakteriofágy, kosmidy a bakteriální umělé chromozomy (BAC). Nejčastěji používanými vektory jsou geneticky upravené plazmidy. pBR322 a pUC19 jsou dva typy plazmidových vektorů.
Co je pBR322?
pBR322 je plazmidový vektor. Je to jeden z prvních široce používaných klonovacích vektorů pro E. coli. Tento vektor byl poprvé vytvořen v roce 1977 v laboratoři Herberta Boyera na University of California, San Francisco. Jedná se o kruhovou dvouvláknovou DNA o délce 4361 párů bází.
Obrázek 01: pBR322
Tento plazmidový vektor má speciální vlastnosti. Normálně má dva geny rezistence na antibiotika: gen bla kódující protein rezistence na ampicilin (AmpR) a gen tetA kódující rezistenci na tetracyklin (TetR) bílkoviny. Navíc obsahuje počátek replikace pMB1. Tento plazmidový vektor má také gen rop, který kóduje omezovač počtu kopií plazmidu. Kromě toho má tento vektor jedinečná restrikční místa pro více než 40 restrikčních enzymů. Jedenáct z těchto čtyřiceti restrikčních míst leží v genu TetR . V promotoru genu TetR jsou dvě restrikční místa pro restrikční enzymy HindIII a Clal. Kromě toho existuje šest velmi důležitých restrikčních míst v genu AmpR. pBR322 je klonovací vektor s nízkým počtem kopií. Poskytuje přibližně 20 kopií plazmidu na bakteriální buňku. Molekulová hmotnost vektoru je 2,83×106 d altonů.
Co je pUC19?
pUC19 je plazmidový vektor o délce 2686 párů bází. Je to jeden ze série plazmidových vektorů vytvořených Joachimem Messingem a spolupracovníky. První práce na této plazmidové sérii byly provedeny na University of California. Je to kruhová dvouvláknová DNA.
Obrázek 02: pUC19
Tento plazmidový vektor také obsahuje důležité vlastnosti. Má N-koncový fragment genu β-glaktosidázy (lacz). Má také oblast vícenásobného klonovacího místa (MCS). Tato oblast je rozdělena na kodony 6 a 7 genu lacz. Oblast MCS poskytuje mnoho restrikčních míst pro restrikční endonukleázy. Kromě genu β-glaktosidázy kóduje pUC19 také gen rezistence na ampicilin (AmpR). Kromě toho je počátek replikace odvozen z plazmidu pMB1. I když je pUC19 malý, má vysoký počet kopií (500-700 kopií na bakteriální buňku). Molekulová hmotnost tohoto plazmidového vektoru je 1,75×106 d altonů.
Jaké jsou podobnosti mezi pBR322 a pUC19?
- pBR322 a pUC19 jsou dva typy plazmidových vektorů.
- Jsou to oblíbené klonovací vektory pro coli.
- Oba plazmidové vektory mají stejný počátek replikace plazmidu pMB1.
- Tyto vektory mají několik restrikčních míst.
- Oba plazmidové vektory mají gen rezistence na ampicilin jako volitelný marker.
Jaký je rozdíl mezi pBR322 a pUC19?
pBR322 je plazmidový vektor o délce 4361 párů bazí, zatímco pUC19 je plazmidový vektor o délce 2686 párů bazí. Toto je klíčový rozdíl mezi pBR322 a pUC19. Kromě toho pBR322 je plazmidový vektor s nízkým počtem kopií, zatímco pUC19 je plazmidový vektor s vysokým počtem kopií.
Níže uvedená infografika představuje rozdíly mezi pBR322 a pUC19 ve formě tabulky pro srovnání vedle sebe.
Shrnutí – pBR322 vs pUC19
Nejběžněji používanými klonovacími vektory pro E.coli jsou geneticky upravené plazmidy.pBR322 a pUC19 jsou dva typy plazmidových vektorů. pBR322 je plazmidový vektor, který má délku 4361 párů bází, zatímco pUC19 je plasmidový vektor, který má délku 2686 párů bází. Toto je klíčový rozdíl mezi pBR322 a pUC19.
