Klíčový rozdíl mezi kinetickou a koncovou reakcí je v tom, že v metodě kinetické reakce měříme rozdíl v absorbanci mezi dvěma body během progrese reakce, zatímco u metody koncové reakce měříme celkové množství analyty, které se účastní reakce.
Metoda kinetické reakce a metoda koncové reakce jsou užitečné v enzymové analýze. Tyto metody využíváme především v klinické chemii. Kromě těchto dvou metod existuje další metoda; metoda pevného času.
Co je kinetická reakce?
Metoda kinetické reakce je analytická metoda používaná v klinické chemii ke stanovení rozdílu v absorbanci mezi dvěma body progrese reakce. Zde pro toto určení používáme zadané časové období. Toto rozhodnutí bychom měli předpokládat; během sledovaného časového intervalu se tvoří konstantní množství produktu. Obvykle uvažujeme krátký časový úsek (20 sekund až 1 minuta). To je, aby se zabránilo jakémukoli účinku způsobenému degradací enzymů během postupu reakce.
Před zahájením reakce bychom měli provést předinkubaci, abychom se vyhnuli interferencím pocházejícím z jiných látek, než je analyt. Během předinkubace tyto látky zcela reagují s reagenčním systémem. Existují dva hlavní typy jako;
- Zvyšující se typ: reakce probíhá pozitivně Zde je počáteční absorbance vždy nižší než konečná absorbance.
- Typ klesající: reakce probíhá negativně Počáteční absorbance je vyšší hodnota než konečná absorbance.
Co je reakce koncového bodu?
Metoda reakce koncového bodu je analytická metoda užitečná v klinické chemii ke stanovení celkového množství analytů spotřebovaných během progrese reakce. v této metodě uvažujeme spíše koncový bod reakce než dva specifické body jako u kinetické metody. Obvykle se koncový bod objeví během 5 až 15 minut při 37 ◦C.
Obrázek 01: K měření absorbance můžeme použít spektrofotometry
Reakce může na konci poskytnout buď barevný produkt, nebo bezbarvý produkt. Absorbanci tohoto produktu však můžeme změřit pomocí spektrofotometru. Absorbance vzorku se zvyšuje s časem. Dosahuje stabilní hodnoty, která se dále s časem nemění. Toto je konečný bod reakce.
Jaký je rozdíl mezi kinetickou a koncovou reakcí?
Metoda kinetické reakce je analytická metoda používaná v klinické chemii ke stanovení rozdílu v absorbanci mezi dvěma body progrese reakce. Zde měříme rozdíl v absorbanci mezi dvěma body v průběhu reakce. Navíc doba potřebná pro tuto reakci je přibližně 20 sekund až 1 minuta. Zatímco metoda reakce koncového bodu je analytická metoda používaná v klinické chemii ke stanovení celkového množství analytů spotřebovaných během postupu reakce. Při této metodě měříme celkové množství analytů, které se účastní reakce. Navíc doba potřebná pro tuto reakci je 5 až 15 minut.
Shrnutí – kinetická vs. koncová reakce
Existují tři hlavní reakční metody, které používáme v klinické chemii pro analýzu enzymatických reakcí; kinetická metoda, metoda pevného času a metoda koncového bodu. Rozdíl mezi kinetickou a koncovou reakcí je v tom, že u metody kinetické reakce měříme rozdíl v absorbanci mezi dvěma body během průběhu reakce, zatímco u metody koncové reakce měříme celkové množství analytů, které se účastní reakce.
