Klíčový rozdíl mezi iontoměničovou a vylučovací chromatografií je ten, že iontoměničová chromatografie se používá k analýze iontových látek podle náboje, zatímco vylučovací chromatografie se používá k analýze velkých molekul podle velikosti.
Chromatografie je analytická technika, kterou lze použít k analýze různých směsí. Chromatografické techniky jsou pojmenovány podle parametru použitého k analýze látek – např. chromatografie podle velikosti, iontoměničová chromatografie atd.
Co je iontoměničová chromatografie?
Iontově výměnná chromatografie je analytická technika, při které můžeme analyzovat iontové látky. Často je užitečné analyzovat anorganické anionty a kationty (tj. chloridové a dusičnanové anionty a draselné, sodné kationty). Ačkoli to není příliš běžná metoda, můžeme pomocí ní analyzovat organické ionty. Navíc můžeme tuto techniku použít pro čištění proteinů, protože proteiny jsou nabité molekuly při určitých hodnotách pH. Zde používáme pevnou stacionární fázi, ke které se mohou nabité částice připojit. Jako pevný nosič můžeme například použít pryskyřicové kopolymery polystyren-divinylbenzen.
Obrázek 01: Teorie ionexové chromatografie
Abychom to dále vysvětlili, stacionární fáze má pevné ionty, jako jsou síranové anionty nebo kationty kvartérních aminů. Každý z nich by se měl spojit s protiiontem (iont s opačným nábojem), pokud chceme zachovat neutralitu tohoto systému. Pokud je protiiontem kation, pak systém pojmenujeme jako katexovou pryskyřici. Ale pokud je protiiont anion, systém je aniontoměničová pryskyřice. Kromě toho existuje pět hlavních kroků v iontoměničové chromatografii:
- Počáteční fáze
- Adsorpce cíle
- Začátek eluce
- Konec eluce
- Regenerace
Co je to Size Exclusion Chromatography?
Vylučovací chromatografie nebo SEC je analytická technika, při které lze molekuly ve směsi oddělit podle jejich velikosti a molekulové hmotnosti. Obvykle pracuje s velkými molekulami nazývanými makromolekuly. Typicky se pro analýzu používá vodný roztok. Pak se nazývá gelová filtrační chromatografie. Když organické rozpouštědlo, nazývá se to gelová permeační chromatografie.
Gelová filtrační chromatografie je forma vylučovací chromatografie, při které jako mobilní fázi používáme vodný roztok. Proto mobilní fází, kterou často používáme v této technice, je vodný pufr. Také pro tuto separaci používáme chromatografickou kolonu a potřebujeme kolonu naplnit porézními kuličkami. Obvykle se jako porézní materiál hodí Sephadex a agaróza. Tyto materiály jsou tedy stacionární fází našeho experimentu. Navíc můžeme použít velikost pórů těchto kuliček k určení velikosti makromolekul, které oddělujeme. Je to však pouze odhad.
Obrázek 02: Zařízení pro vylučovací chromatografii
Gelová permeační chromatografie je forma vylučovací chromatografie, při které jako mobilní fázi používáme organické rozpouštědlo. Proto pro tento účel můžeme použít roztoky, jako je hexan a toluen. Stacionární fáze je porézní materiál, stejný jako při gelové filtrační chromatografii. Tato technika se často používá na polymery a další organicky rozpustný materiál. Metoda působení této techniky je podobná jako u gelové filtrační chromatografie.
Jaký je rozdíl mezi iontovou výměnou a vylučovací chromatografií?
Chromatografie je analytická technika, kterou lze použít k analýze různých směsí. Klíčový rozdíl mezi iontoměničovou a vylučovací chromatografií je ten, že iontoměničová chromatografie se používá k analýze iontových látek podle náboje, zatímco vylučovací chromatografie se používá k analýze velkých molekul podle velikosti.
Níže uvedená infografika poskytuje více informací o rozdílu mezi iontovou výměnou a vylučovací chromatografií.
Shrnutí – Iontově výměnná vs. Size Exclusion Chromatography
Chromatografie je analytická technika, kterou lze použít k analýze různých směsí. Klíčový rozdíl mezi iontoměničovou a vylučovací chromatografií je ten, že iontoměničová chromatografie se používá k analýze iontových látek podle náboje, zatímco vylučovací chromatografie se používá k analýze velkých molekul podle velikosti.
