Klíčový rozdíl mezi radioimunotestem a imunoradiometrickým testem spočívá v tom, že při radioimunotestu se vzorek nebo sloučenina, která má být měřena, před kombinací zkombinuje s radioaktivním antigenem, zatímco v imunoradiometrickém testu se vzorek nebo sloučenina okamžitě spojí s radioaktivně značeným protilátky.
Imunoanalýza je biochemický test, který detekuje přítomnost nebo koncentraci makromolekul v roztoku pomocí protilátky nebo antigenu. Fluorescenční a radioaktivní protilátky se používají k měření antigenů ve vzorku. Zpočátku byly protilátky používány v precipitačních technikách, jako je imunoprecipitace, imunodifúze a imunitní elektroforéza pro analýzu sérových proteinů. V současnosti se pro měření léků, nádorových markerů a hormonů používají vysoce citlivé techniky, jako je radioimunoanalýza a imunoradiometrické stanovení.
Co je radioimunoanalýza?
Radioimunoanalýza (RIA) je imunoanalýza, která využívá radioaktivní prvky postupnou tvorbu komplexů antigen-protilátka. RIA obvykle používá radioaktivní protilátky k detekci množství antigenu ve vzorku. RIA je velmi specifický a vysoce citlivý test in vitro. Principem RIA je soutěžní závaznost. Zde radioaktivní antigen soutěží s neradioaktivním antigenem o konstantní množství vazebných míst protilátky nebo receptoru. RIA vyžaduje speciální licencování a preventivní opatření, protože se používají radioaktivní látky, a zůstává mezi nejlevnějšími technikami.
Obrázek 01: Immunoassay
Během RIA se známé množství antigenu často stává radioaktivním tím, že je označeno gama-radioaktivními izotopy jódu navázanými na tyrosin. Poté je tento antigen kombinován se známým množstvím protilátky. Zde se antigen i protilátka specificky vážou jedna na druhou. Poté se přidá vzorek krevního séra k zahájení kompetitivní reakce mezi značenými antigeny a neznačenými antigeny v séru se specifickými protilátkami. Při této reakci protilátky uvolňují určité množství značeného antigenu. Toto množství je úměrné poměru značeného k neznačenému antigenu. Nakonec se vygeneruje vazebná křivka pro odvození množství antigenu v krevním séru pacienta.
Co je imunoradiometrický test?
Imunoradiometrický test (IRMA) je imunotest, který využívá radioaktivně značené protilátky. V IRMA jsou protilátky značeny pomocí radioizotopů. Tyto protilátky se vážou na antigeny přítomné ve specifickém vzorku. V pozitivním vzorku se protilátky, které jsou radioaktivně značené, vážou na volné epitopy antigenů. To vytváří komplex antigen-protilátka.
Během druhé reakce jsou značené protilátky, které nejsou navázané, odstraněny pomocí antigenu na pevné fázi. Zbývající počet radioaktivních protilátek v roztoku je přímou funkcí koncentrace antigenu. IRMA je známá jako test s přebytkem činidla, kde se jako činidlo používá nadměrné množství radioaktivně značené protilátky. Zde se nechá reagovat nadměrná koncentrace značené protilátky nebo antigenu. V posledním kroku se oddělí antigen navázané a volné protilátky a frakce navázaná na antigen se podrobí radioaktivním testům. Zde je aktivita frakce přímo úměrná koncentraci antigenu.
Jaké jsou podobnosti mezi radioimunotestem a imunoradiometrickým testem?
- Radioimunotest i imunoradiometrický test jsou imunotesty, které využívají radioaktivní prvky při postupné tvorbě komplexů antigen-protilátka.
- Tvoří komplex antigen-protilátka.
Jaký je rozdíl mezi radioimunotestem a imunoradiometrickým testem?
Radioimunoanalýza je imunoanalýza, která určuje hladiny protilátek pomocí antigenu značeného radioizotopem, zatímco imunoradiometrické stanovení je přebytek činidla, který využívá přebytečnou koncentraci radioaktivně značené protilátky. Toto je klíčový rozdíl mezi radioimunotestem a imunoradiometrickým testem. IRMA je schopna poskytnout vyšší citlivost než RIA. V RIA jsou antigeny značeny gama-radioaktivními izotopy jódu, zatímco v IRMA protilátky jsou značeny pomocí izotopů jódu. To je také rozdíl mezi radioimunotestem a imunoradiometrickým testem. Vzhledem k tomu, že IRMA je technika s přebytkem reagencií, test se provádí v kratším čase než RIA.
Následující tabulka shrnuje rozdíly mezi radioimunoanalýzou a imunoradiometrickou analýzou.
Shrnutí – Radioimunotest vs imunoradiometrický test
Radioimunoanalýza je imunoanalýza, která využívá radioaktivní prvky v postupné tvorbě ke stanovení hladin protilátek. RIA obvykle používá radioaktivní protilátky. Radioaktivní antigen soutěží s neradioaktivním antigenem o konstantní množství vazebných míst protilátky nebo receptoru. Imunoradiometrický test je imunotest prováděný za účelem stanovení hladin antigenu ve vzorku pomocí radioaktivně značených protilátek. Tyto protilátky se vážou na antigeny přítomné ve specifickém vzorku. Na konci každého testu se vytvoří komplex antigen-protilátka. Aby se získaly výsledky testů, sestrojí se vazebná křivka. V radioimunotestu je množství značeného antigenu úměrné poměru značeného k neznačenému antigenu, ale v imunoradiometrickém testu je aktivita frakce vázané na antigen přímo úměrná koncentraci antigenu. Toto je shrnutí rozdílu mezi radioimunotestem a imunoradiometrickým testem.
