Klíčový rozdíl – Monolayer vs Suspension Culture
Tkáňová kultura je metodologie, která se používá k vyvolání růstu buněk, které jsou odděleny od organismu a jsou pěstovány v různých kultivačních médiích. V tkáňové kultuře hrají důležitou roli kultivační média. Různé buňky rostou v různých kultivačních médiích v závislosti na fyziologických a chemických vlastnostech buněk. Monovrstvá kultura a suspenzní kultura jsou dva hlavní typy kultur, které se používají během procesu tkáňové kultury. Jednovrstvá kultura je kultura závislá na ukotvení, kde buňka roste, zatímco je připojena k substrátu, a suspenzní kultura je kultura nezávislá na ukotvení, kde se buněčné agregáty používají k ustavení buněčných kultur v kapalném médiu. Toto je klíčový rozdíl mezi monovrstvou kulturou a suspenzní kulturou.
Co je to jednovrstvá kultura?
Monovrstvá kultura je definována jako typ kultury, ve které jsou buňky kultivovány v jedné vrstvě na baňce nebo Petriho misce obsahující kultivační médium. Jednovrstvá kultura je také označována jako adherentní kultura nebo kultura závislá na ukotvení. Důvodem odkazu na adherentní nebo na ukotvení závislou kulturu je to, že tyto buňky potřebují substrát pro připojení během svého růstu. Přilnou k buněčné kultuře obsahující substrát.
Substráty, které se používají v kultivačním médiu, by měly být před použitím nabity. Tyto nabité substráty podporují interakce mezi buňkami. Zdroje, které se používají k nabíjení těchto substrátů, jsou elektrický iontový výboj, povlaky s divalentními kationty a gama záření. V jednovrstvém kultivačním médiu, jakmile jsou buňky naočkovány, je růst regulován pomocí procesu zvaného kontaktní inhibice. Během kontaktní inhibice je buněčný růst zastaven, aby se zastavilo množení normálních buněk, jakmile vytvoří monovrstvu připojenou k povrchu.
Obrázek 01: Adherent Culture
Buňky, jejichž připojení závisí na jiných substrátech, se označují jako adherentní buňky. Tyto adherentní buňky jsou často odvozeny z orgánových tkání, jako jsou ledviny atd. Tyto buňky jsou nepohyblivé a jsou typicky připojeny k pojivové tkáni. Proto by při pěstování těchto buněk na kultivačním médiu měly být poskytnuty všechny tyto základní růstové faktory. Důležitost jednovrstvé kultury spočívá v tom, že napodobuje původní přirozené podmínky pro správné ustavení buňky.
Co je to Suspension Culture?
Suspenzní kultura by mohla být definována jako typ kultury, kde množení malých agregátů buněk nebo jednotlivých buněk probíhá suspendováno v kapalném médiu, které je neustále promícháváno. Jinými slovy, suspenzní kultura je také známá jako buněčná kultura buněčné suspenzní kultury. Tato kultura pomáhá při zakládání jednotlivých buněčných kultur, které by mohly být využity při zkoumání rostlinných buněk s ohledem na jejich různé potenciály a vlastnosti. Výzkum tohoto aspektu by mohl být použit k pochopení vzájemných vztahů mezi buňkami a jejich vlivy, pokud jde o mnohobuněčné organismy.
Během počátečního vývoje rostliny se vytvoří kalus, který je shlukem nediferencovaných buněk. Tato úroveň růstu způsobuje překážky pro identifikaci buněčných událostí během růstových a vývojových fází rostliny. K překonání této situace byla zavedena suspenzní kultura, protože poskytla vynikající kultivační médium pro vytvoření jednotlivých buněčných kultur z malých buněčných agregátů získaných z kalusu. To bylo využito ke studiu různých morfologických a biochemických aspektů během počátečních fází vývoje rostliny.
Obrázek 02: Suspension Culture
V souvislosti se získáním ideální buněčné kultury je typickou metodou přenesení drobivé hmoty kalusu do protřepaného kapalného média, kde se hmota rozbije a snadno disperguje. Poté jsou velké kalusy vytříděny a ponechány malé buněčné agregáty a jednotlivé buňky. Poté jsou tyto buňky přeneseny do jiného média. Aktivně rostoucí buňky se získají po dvou až třech týdnech.
Jaké jsou podobnosti mezi monovrstvou a suspenzní kulturou?
- Jak jednovrstvé, tak suspenzní kultury jsou dva typy buněčných kultur, které se používají k vytvoření buňky
- Jak jednovrstvé, tak suspenzní typy kultur se pěstují na vhodných kultivačních médiích.
- V tkáňových kulturách se běžně používají jednovrstvé i suspenzní kultury.
Jaký je rozdíl mezi monolayer a suspenzní kulturou?
Monolayer vs Suspension Culture |
|
| Jednovrstvá kultura je kultura závislá na ukotvení, kde buňky rostou, zatímco jsou připojeny k substrátu. | Suspenzní kultura je kultura nezávislá na ukotvení, kde množení malých agregátů buněk nebo jednotlivých buněk probíhá suspendováno v kapalném médiu, které se protřepává. |
| Požadavky | |
| Monovrstvá kultivace vyžaduje nádobu ošetřenou tkáňovou kulturou s periodickým pasážováním. | Suspenzní kultivace by mohla být dosažena pomocí nádob, které nebyly ošetřeny tkáňovou kulturou. |
| Omezení růstu | |
| Růst jednovrstvé kultury bude omezen povrchem, který přímo ovlivňuje výnos. | Omezení růstu suspenzní kultury probíhá koncentrací buněk v médiu. |
| Buněčná disociace | |
| Disociace buněk probíhá mechanicky nebo enzymaticky v jednovrstvé kultuře. | Suspenzní kultura nevyžaduje pomoc enzymů a mechanických prostředků pro buněčnou disociaci. |
| Vizualizace buňky | |
| Monovrstvová kultura umožňuje snadnou vizualizaci buněk. | V suspenzních kulturách je těžší zobrazit buňky. |
| Function | |
| Monovrstvá kultura se používá v oblasti cytologie, výzkumu a kontinuálního sběru produktů. | Suspenzní kultura se používá pro hromadnou produkci proteinů, výzkumné studie a dávkový sběr. |
Shrnutí – Monolayer vs Suspension Culture
Monovrstvá kultura a suspenzní kultura jsou dvě hlavní kultury používané v tkáňové kultuře. Jednovrstvá kultura je kultura závislá na ukotvení. Buňky jsou pěstovány v této kultuře, kde jsou připojeny k substrátu přítomnému v kultuře. Substráty se před použitím nabíjejí za účasti různých zdrojů, jako jsou dvojmocné povlaky a iontový výboj. Suspenzní kultury jsou kultury nezávislé na ukotvení, kde buňky rostou bez pomoci substrátu pro připojení. Tato kultura pomáhá při zakládání jednotlivých buněčných kultur, které by mohly být využity při zkoumání rostlinných buněk s ohledem na jejich různé potenciály a vlastnosti. To je rozdíl mezi monovrstvou kulturou a suspenzní kulturou.
