Klíčový rozdíl – TLC vs HPTLC
TLC a HPTLC jsou dvě chemické techniky používané k separaci netěkavých složek ve směsi. Klíčový rozdíl mezi TLC a HPTLC je v tom, že absorpční materiál na TLC desce má velké částice, zatímco HPTLC desky mají velmi malé částice adsorpčního materiálu.
TLC je chromatografie na tenké vrstvě. HPTLC je vysoce výkonná tenkovrstvá chromatografie, což je pokročilá technika ve srovnání s metodou TLC.
Co je TLC?
TLC neboli chromatografie na tenké vrstvě je základní chemická technika používaná k separaci netěkavých složek ve směsi. Tento experiment se provádí pomocí tabulí skla, plastu nebo papíru. Tato fólie je potažena tenkou vrstvou celulózy nebo silikagelu (adsorbční materiál). Tato tenká vrstva je známá jako stacionární fáze TLC. List je známý jako TLC deska.
Před experimentem jsou základní a horní linie označeny tužkou na TLC destičce. Poté se vzorek nanese podél této linie pomocí kapilární trubice. Poté se TLC deska umístí vertikálně do mobilní fáze. Mobilní fáze je rozpouštědlo (nebo směs rozpouštědel) umístěné v nádobě. Při umísťování TLC destičky do této mobilní fáze je třeba udržovat základní linii nad okrajem rozpouštědla. Jinak se vzorek rozpustí v rozpouštědle.
TLC deska může nějakou dobu zůstat v mobilní fázi. Poté, v průběhu času, mobilní fáze stoupá vzhůru po desce v důsledku kapilárního působení. Pokud je vzorek rozpustný v mobilní fázi, bude stoupat nahoru spolu s mobilní fází.
Za touto metodou TLC stojí princip „podobné se rozpouští“. To znamená, že polární sloučeniny se rozpouštějí v polárních rozpouštědlech, zatímco nepolární sloučeniny se rozpouštějí v nepolárních rozpouštědlech. Stacionární fází je obvykle silikagel nebo celulóza, což je polární sloučenina. Použitou mobilní fází je nepolární rozpouštědlo, jako je hexan. Pokud tedy vzorek obsahuje nějaké nepolární složky, budou tyto složky migrovat nahoru spolu s mobilní fází. Polární komponenty se přilepí na desku. Mezi pohyblivými složkami budou středně nepolární sloučeniny migrovat pomalu, zatímco vysoce nepolární sloučeniny budou migrovat rychle. Když čelo rozpouštědla dosáhne horní linie TLC desky, deska se vyjme a nechá uschnout.
Obrázek 01: Technika TLC
Pokud byly komponenty ve vzorku barevné sloučeniny, měly by být na destičce barevné skvrny na různých místech. Ale pokud byly složky bezbarvé, měly by být použity jiné techniky; například rozprašováním ninhydrinu k detekci amoniaku nebo aminů (primární aminy a sekundární aminy).
Co je HPTLC?
HPTLC neboli vysoce výkonná chromatografie na tenké vrstvě je pokročilá forma chromatografie na tenké vrstvě (TLC). Rozlišení a přesnost HPTLC jsou velmi vysoké. Většinu kroků této techniky lze automatizovat.
Destičky používané v HPTLC obsahují částice silikagelu s velmi malou velikostí a hustota uložení gelu na desce je vysoká. Povrch desky je hladký a poskytuje účinnou separaci. Analýza je rychlejší než technika TLC. Citlivost této metody je také vysoká. V HPTLC lze oddělit několik různých vzorků na stejné destičce bez jakéhokoli kroku přípravy vzorku.
Jaký je rozdíl mezi TLC a HPTLC?
TLC vs HPTLC |
|
| TLC je tenkovrstvá chromatografie. | HPTLC je vysoce výkonná tenkovrstvá chromatografie. |
| Technika | |
| Je to základní chemická technika používaná k oddělení netěkavých složek ve směsi. | Jedná se o pokročilou formu chromatografie na tenké vrstvě (TLC). |
| Plate | |
| TLC deska může být vyrobena z papíru, plastu nebo skla, na které je nanesen adsorpční materiál s velkými částicemi. | HPTLC desky mají velmi malé částice adsorpčního materiálu. |
| Rozlišení | |
| Metoda TLC poskytuje špatné rozlišení, pokud má vzorek složky s podobnými vlastnostmi. | Metoda HPTLC poskytuje vysoké rozlišení. |
| Čas | |
| Technika TLC je časově náročná technika. | HPTLC poskytuje výsledky vyšší rychlostí než metoda TLC. |
Shrnutí – TLC vs HPTLC
HPTLC je pokročilá forma TLC. Klíčový rozdíl mezi TLC a HPTLC je v tom, že TLC deska může být vyrobena z papíru, plastu nebo skla, na které je aplikován adsorpční materiál s velkými částicemi, zatímco HPTLC desky mají velmi malé částice adsorpčního materiálu.
