Klíčový rozdíl mezi knock-in a knockout spočívá v metodě použité k vytvoření transgenního organismu. Při knock-in genu dochází k vložení nového genu, zatímco při vyřazení genu k odstranění existujícího genu dochází k vytvoření transgenního organismu.
Transgenní organismy jsou organismy se změněnou genetickou konstitucí. „Rekombinantní organismy“jsou pro ně synonymem. Ve většině případů mají transgenní organismy prospěšné vlastnosti. Při vytváření transgenních organismů se cílem stávají geny. Podle potřeby lze gen zavést nebo odstranit. Knock in genu se týká zavedení nového genu, zatímco knockout genu se týká odstranění genu.
Co je Knock In?
Knock-in neboli genový knock-in je proces vložení nového genu do organismu. Vložený gen musí být po vložení funkční. Různé techniky genového inženýrství provádějí proces genového knock-in. Po genovém knock-in dochází k vytvoření transgenního organismu. Technologie rekombinantní DNA také odkazuje na proces vytváření genu knock-in. V tomto procesu musí být genom organismu rozříznut na konkrétních místech pomocí restrikčních enzymů a poté dojde k vložení cíleného genu. Po vložení enzym ligáza uzavře nový gen do genomu a vytvoří rekombinantní organismus.
Rekombinantní mikroorganismy jsou často využívány k produkci požadovaných produktů, jako jsou vitamíny, enzymy, hormony v průmyslovém měřítku. Kromě toho se genový knock u myší běžně používá pro výzkumné účely. Ukazují, jak se různé geny projevují a chovají v různých prostředích a zdravotních podmínkách. Proto je důležité použít genový knock u myší k určení většiny způsobů léčby různých onemocnění.
Co je Knockout?
Knockout neboli genový knockout je proces úplného odstranění genu z organismu. Tento konkrétní gen je během knockout procesu zcela deaktivován. K vyřazení genu jsou nutné různé techniky genetického inženýrství. Výsledný organismus je transgenní organismus se změněným genetickým složením. Úplná deaktivace konkrétního genu probíhá buď zavedením mutace do konkrétního genu nebo odstraněním konkrétního genového fragmentu restrikčním štěpením.
Obrázek 02: Gene knockout myši
Za prvé, vyřazení genu se týkalo pouze bakterie zvané Escherichia coli. V současnosti však bylo vytvořeno mnoho knockout myší. Knockout myši hrají důležitou roli ve výzkumných studiích. Poskytují závěry o tom, jak delece určitých genů působí na přežití a existenci organismu. Existuje však mnoho etických omezení týkajících se tohoto konceptu.
Knockout genu hraje důležitou roli při analýze genetiky různých zdravotních stavů a hodnocení účinnosti terapií u různých genů.
Jaké jsou podobnosti mezi knock-in a knockoutem?
- Oba používají technologii rekombinantní DNA a různé genetické techniky.
- Vyřazení a vyřazení genů vede k vytvoření transgenního organismu.
- Dají se provádět na živých organismech jakékoli organizační úrovně.
- Obě metody široce využíváme ve výzkumu i v průmyslových aplikacích.
Jaký je rozdíl mezi knock-in a knockoutem?
Rozdíl mezi knock-in a knockout závisí na technice produkce transgenního organismu. Knock-in neboli genový knock-in je proces vložení nového genu do organismu. Naproti tomu genový knockout je proces úplné deaktivace nebo odstranění požadovaného genu. Každá metoda má za následek různé výsledky v závislosti na změně.
Níže uvedená infografika představuje více informací o rozdílu mezi knock-in a knockout.
Shrnutí – Knock In vs Knockout
Knock in a knockout označují dvě metody vytváření transgenních organismů buď vložením nebo úplnou deaktivací genů. Tyto dvě metody jsou tedy důležité ve výzkumu a v různých průmyslových aplikacích. Technologie rekombinantní DNA je proces vytváření těchto genů knock-in a gen knockout. Gene knock-in a knockout hrají prospěšnou roli; nicméně, etické omezení za vytvořením genu knock-in a knockout je věc debaty ve vědecké komunitě. Toto shrnuje rozdíl mezi knock-in a knock out.
