Klíčový rozdíl – DMEM vs EMEM
Kultivace živočišných buněk se provádí za účelem udržení linií živočišných buněk za účelem provádění mnoha výzkumných aktivit. Živočišné buněčné linie jsou udržovány za sterilních podmínek a vyžadují speciální techniky. Používají se ve studiích týkajících se výroby vakcín, k identifikaci chování buňky vůči karcinogenům a mutageny a při výzkumu rakoviny. Buněčná kultivační média jsou velmi důležitá pro úspěch živočišné buněčné kultury. Existují různé typy médií pro kultivaci buněk, jako je Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) a Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). DMEM je modifikované základní médium se zvýšenými koncentracemi aminokyselin a vitamínů až čtyřnásobně. To také zahrnuje některé další substituce, které zvyšují nutriční podmínky média. EMEM je jedním z prvních typů kultivačních médií živočišných buněk vyvinutých Harrym Eaglem. Je to jednoduché, základní médium s minimálním množstvím živin. Klíčovým rozdílem mezi dvěma médii je složení živin. EMEM se skládá z minimálních koncentrací živin potřebných pro růst kultury, zatímco DMEM je mnohem komplexní médium se zvýšenými koncentracemi aminokyselin a vitamínů.
Co je DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) je modifikovaný typ média, který se komerčně připravuje jako krémově bílý prášek. To je upraveno z EMEM a složení živin je upraveno zvýšením koncentrace aminokyselin a vitamínů. Koncentrace aminokyselin je zvýšena až dvojnásobně ve srovnání s bazálním médiem. Koncentrace vitaminu se zvýší až čtyřnásobně, čímž se zvýší obsah živin v médiu.
DMEM je také upraven přidáním více solí, jako je dusičnan železitý, pyruvát sodný a některé neesenciální aminokyseliny, jako je serin a glycin. Koncentrace glukózy v médiu je také změněna. Původní formulace se skládá z 1000 mg/l glukózy, zatímco v DMEM je koncentrace zvýšena až na 4500 mg/l. DMEM také vyžaduje doplnění sérového média, protože to není kompletní médium. Nejčastěji se DMEM doplňuje fetálním bovinním sérem (FBS). FBS poskytuje potřebné proteiny a růstové faktory pro proces kultivace.
Ph média se mění po přidání hydrogenuhličitanu sodného. pH média před přidáním hydrogenuhličitanu sodného je kolem 6,80 – 7,40, zatímco pH po přidání hydrogenuhličitanu sodného je v rozmezí 7,60 – 8,20. Skladovací teplota média je 2 – 8 0C.
Obrázek 01: DMEM
Aplikace DMEM
- Studovat schopnost polyomaviru tvořit plaky v myších embryonálních buňkách.
- Ve studiích kontaktní inhibice
- V kulturách kuřecích buněk
Co je EMEM?
Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) je jedním z prvních vyvinutých médií v buněčné kultivaci živočišných buněčných linií. První typy živočišných buněčných linií pěstovaných pomocí EMEM zahrnují myší L buňky a HeLa buňky. Médium EMEM je také typem modifikovaného média. Harry Eagle nejprve formuloval médium EMEM. EMEM média obsahovala esenciální aminokyseliny a vitamíny v minimální koncentraci požadované buněčnými typy. Ve formulaci nebyly zahrnuty neesenciální aminokyseliny a koncentrace glukózy a hydrogenuhličitanu sodného jsou sníženy. Ačkoli médium obsahovalo vyvážené množství minimálních růstových požadavků pro úspěšný růst buněk.
EMEM není kompletní médium. Proto je pro úspěšný růst savčích buněk vyžadována suplementace sérem. EMEM se používá na široké škále buněk a je stále oblíbeným médiem mezi výzkumníky buněčných kultur.
Jaké jsou podobnosti mezi DMEM a EMEM?
- Oba typy médií se používají ve zvířecích buněčných kulturách.
- Oba typy médií jsou kapalné přípravky.
- Oba typy médií jsou upravená média ze základního média.
- Oba typy médií obsahují esenciální aminokyseliny, vitamíny a anorganické soli, které jsou nezbytné pro růst.
- Oba typy médií jsou neúplné. Proto by mělo být přidáno sérum.
- Oba typy médií používají jako zdroj uhlíku glukózu.
- Oba typy médií mají vyšší pH a upravují se přidáním hydrogenuhličitanu sodného.
Jaký je rozdíl mezi DMEM a EMEM?
DMEM vs EMEM |
|
| DMEM je upravený typ bazálního média se zvýšenými koncentracemi aminokyselin a vitamínů. To také zahrnuje některé další substituce, které zvyšují podmínky živin v médiu. | EMEM je jedním z prvních typů kultivačních médií živočišných buněk vyvinutých Harrym Eaglem. Je to jednoduché, základní médium s minimálním množstvím živin. |
| Modifikace aminokyselin | |
| Koncentrace aminokyselin se v médiu DMEM zvýšila až dvojnásobně. | V EMEM se používá minimální koncentrace aminokyselin. |
| Úpravy vitamínů | |
| Koncentrace vitamínů se v DMEM zvýšila až čtyřnásobně. | V EMEM se používá minimální koncentrace vitamínů. |
| Koncentrace glukózy | |
| Koncentrace glukózy se v DMEM zvýšila až na 4500 mg/l. | Koncentrace glukózy je 1000 mg/l v EMEM. |
| Přítomnost neesenciálních aminokyselin | |
| Přítomno v DMEM. | Nepřítomný v EMEM. |
| Přítomnost dalších komponent | |
| Složky jako dusičnan železitý, pyruvát sodný jsou přítomny v DMEM. | EMEM obsahuje minimální množství živin. |
Shrnutí – DMEM vs EMEM
DMEM a EMEM jsou dvě oblíbená kultivační média živočišných buněk, která se liší hlavně složením živin. DMEM je modifikovaná forma EMEM, kde se koncentrace živin zvyšují spolu s přidáním některých nových složek. EMEM je minimální médium a obsahuje všechny základní faktory potřebné pro úspěšný růst živočišných buněčných linií. Tato média by měla být používána za vysoce sterilních podmínek a obě média by měla být před použitím doplněna sérem. Toto je rozdíl mezi DMEM a EMEM.
Stáhněte si PDF DMEM vs EMEM
Můžete si stáhnout PDF verzi tohoto článku a použít ji pro offline účely podle citace. Stáhněte si prosím PDF verzi zde Rozdíl mezi DMEM a EMEM
