Klíčový rozdíl mezi absorbancí a fluorescencí je v tom, že můžeme použít techniku analýzy absorbance k přímému měření množství specifické vlnové délky, která je absorbována vzorkem bez ředění nebo přípravy testu, zatímco fluorescenční analýza vyžaduje přípravu vzorku, ve které sledovaný vzorek musí být navázán na fluorescenční činidla v testovací soupravě.
Absorpce a fluorescence jsou důležité analytické techniky, které můžeme použít k detekci různých vlastností v daném vzorku.
Co je Absorbance?
Absorpce je míra schopnosti látky absorbovat světlo o určité vlnové délce. Konkrétně se rovná logaritmu převrácené hodnoty propustnosti. Na rozdíl od optické hustoty měří absorbance množství světla absorbovaného látkou.
Spektroskopie navíc měří absorbanci (pomocí kolorimetru nebo spektrofotometru). Absorbance je bezrozměrná vlastnost, na rozdíl od většiny ostatních fyzikálních vlastností. Absorbanci lze vysvětlit dvěma způsoby: jako světlo absorbované vzorkem nebo jako světlo procházející vzorkem. Rovnice pro výpočet absorbance je následující:
A=log10(I0/I)
Kde A je absorbance, I0 je záření přenášené ze vzorku a I je dopadající záření. Následující rovnice je také podobná výše uvedené rovnici z hlediska propustnosti (T).
A=-log10T
Co je fluorescence?
Fluorescence je emise světla z látky, která dříve absorbovala energii. Takové látky musí absorbovat světlo nebo jakékoli jiné elektromagnetické záření, aby emitovaly světlo jako fluorescenci. Kromě toho je toto emitované světlo typem luminiscence, což znamená, že vyzařuje spontánně. Vyzařované světlo má často delší vlnovou délku než světlo absorbované. To znamená, že vyzařovaná světelná energie je nižší než absorbovaná energie.
Během procesu fluorescence je světlo emitováno jako výsledek excitace atomů v látce. Absorbovaná energie je často uvolněna jako luminiscence ve velmi krátkém časovém úseku, asi 10-8 sekund. To znamená, že můžeme pozorovat fluorescenci, jakmile odstraníme zdroj záření, který způsobuje excitaci.
Existuje mnoho aplikací fluorescence v různých oblastech, jako je mineralogie, gemologie, lékařství, chemické senzory, biochemický výzkum, barviva, biologické detektory, výroba zářivek atd. Navíc tento proces můžeme považovat také za přirozený proces; například v některých minerálech.
Jaký je rozdíl mezi absorbancí a fluorescencí?
Absorpce a fluorescence jsou důležité analytické techniky, které můžeme použít k detekci různých vlastností v daném vzorku. Klíčový rozdíl mezi absorbancí a fluorescencí je v tom, že můžeme použít techniku analýzy absorbance k přímému měření množství specifické vlnové délky, která je absorbována vzorkem bez ředění nebo přípravy testu, zatímco fluorescenční analýza vyžaduje přípravu vzorku, ve kterém musí být požadovaný vzorek navázaný s fluorescenčními činidly v testovací soupravě. Fluorescenční technika je navíc účinnější než absorbance, protože fluorescenční test je vysoce specifický pro cílový analyt.
Níže uvedená infografika představuje rozdíly mezi absorbancí a fluorescencí ve formě tabulky pro srovnání vedle sebe
Shrnutí – Absorbance vs fluorescence
Absorpce je míra schopnosti látky absorbovat světlo o určité vlnové délce. Fluorescence je emise světla z látky, která předtím absorbovala energii. Klíčový rozdíl mezi absorbancí a fluorescencí je v tom, že můžeme použít techniku analýzy absorbance k přímému měření množství specifické vlnové délky, která je absorbována vzorkem bez ředění nebo přípravy testu, zatímco fluorescenční analýza vyžaduje přípravu vzorku, ve kterém musí být požadovaný vzorek vázáno s fluorescenčními činidly v testovací soupravě.