Klíčový rozdíl – Adherent vs. Suspension Cell Lines
Buněčná linie je trvale zavedená buněčná kultura, která může být proliferována a pěstována za speciálních podmínek. Několik buněčných linií, jako jsou rakovinné buněčné linie, hepatocyty a buňky kostní dřeně, je udržováno jako buněčné linie pro usnadnění výzkumu. Buněčné linie se připravují z primárních kultur a mohou být převážně dvou typů, a to adherentní buněčné kultury a suspenzní buněčné kultury. Buněčné linie odvozené z těchto kultur se tedy označují jako adherentní buněčné linie a suspenzní buněčné linie. Adherentní buněčné linie jsou buněčné linie, ve kterých jsou primární kultury připojeny k pevné podložce, a jsou tedy buňkami závislými na ukotvení. Suspenzní buněčné linie jsou buněčné linie, ve kterých jsou kultury suspendovány v tekutém médiu a buňky tak zůstávají v tekutém médiu. Nejsou závislé na ukotvení. Klíčovým rozdílem mezi buněčnými liniemi Adherent a Suspension je závislost buněk na ukotvení. Adherentní buněčné linie potřebují pro svůj růst pevnou podporu, a proto jsou závislé na ukotvení, zatímco suspenzní buněčné linie jsou nezávislé na ukotvení a nepotřebují pevnou podporu pro růst.
Co jsou adherentní buněčné linie?
Adherentní buněčné linie jsou buněčné linie, které jsou závislé na ukotvení. Proto tyto buněčné linie vyžadují stabilní podporu pro svůj růst. Většina extrahovaných buněk obratlovců (kromě hematopoetických buněk) je závislá na ukotvení. Proto je většina buněk obratlovců kultivována spolu s adherentem, který zajistí stabilní růst buněk.
Většina adherentních buněčných linií je založena v nádobě ošetřené tkáňovou kulturou a jejich růst je omezen na oblast cévy nebo adherentu. Při ošetření buněk pro kultivaci adherentních buněčných linií by měly být buňky disociovány trypsinizací a poté by měly být aplikovány techniky opakovaného pasážování, aby se vytvořily adherentní buněčné linie. Běžné aplikace buněčných linií připravených z adherentních kultur jsou v cytologii a v cytogenetice. Používají se také pro výzkumné účely.
Co jsou Suspension Cell Lines?
Suspenzní buněčné linie jsou nezávislé na ukotvení. Jsou odvozeny ze suspenzní kultury, která může snadno růst v suspendovaném kapalném médiu. Suspenze buněčných kultur by měla být nepřetržitě třepána, aby se udržel její růst. Lidské hematopoetické buňky jsou pěstovány hlavně jako suspenzní kultury, a proto jsou udržovány jako suspenzní buněčné linie, když jsou použity pro výzkumné účely.
Údržba suspenzních buněčných linií vyžaduje nepřetržité míchání a několik pasáží. Růst suspenzních buněk je omezen koncentrací buněk v médiu. Postupem času se tedy růstové faktory a složky média vyčerpávají, což omezuje růst buněk.
Obrázek 01: Suspenzní kultura Pseudomonas spp
Suspenzní buněčné linie jsou nejrozšířenějším typem primárních buněčných linií v komerční produkci. Většina mikrobiálních buněk je udržována jako suspenzní buňky, kde se používají k extrakci užitečných sekundárních metabolitů, jako jsou antibiotika, vitamíny, aminokyseliny a proteiny. Kultury suspenzních buněčných linií poskytují mnohem vyšší produkty než adherentní buněčné linie a jsou méně pracné a vyžadují menší výdaje ve srovnání s adherentními buněčnými liniemi.
Jaké jsou podobnosti mezi adherentními a závěsnými buněčnými liniemi?
- Adherentní i suspenzní buněčné linie pocházejí z primárních buněčných kultur.
- Adherentní i suspenzní buněčné linie vyžadují optimální podmínky média a podmínky růstu, aby byl umožněn maximální růst.
- Adherentní i suspenzní buněčné linie se připravují za podmínek in vitro a mohou být skladovány za speciálních podmínek skladování.
- Adherentní i suspenzní buněčné linie vyžadují kontinuální pasážování, aby se zvýšil výtěžek.
- Adherentní i suspenzní buněčné linie se používají v technikách tkáňových kultur, ve farmakologických studiích pro hodnocení metabolismu léčiv a při diagnostice onemocnění.
Jaký je rozdíl mezi adherentními a závěsnými buněčnými liniemi?
Adherent vs Suspension Cell Lines |
|
| Adherentní buněčné linie jsou buněčné linie, ve kterých jsou primární kultury připojeny k pevné podložce. | Suspenzní buněčné linie jsou buněčné linie, ve kterých jsou kultury suspendovány v tekutém médiu a buňky tak zůstávají v tekutém médiu. |
| Anchorage Dependency | |
| Adherentní buněčné linie jsou závislé na ukotvení. | Suspenzní buněčné linie jsou nezávislé na ukotvení. |
| Agitace | |
| Adherentní buněčné linie nevyžadují míchání. | Suspenzní buněčné linie vyžadují míchání. |
| Trypsinizace | |
| Trypsinizace je přítomna v adherentních buněčných liniích. | Trypsinizace v suspenzních buněčných liniích chybí. |
| Cévy ošetřené tkáňovou kulturou | |
| Vyžadováno u adherentních buněčných linií. | Není vyžadováno u suspenzních buněčných linií. |
| Výtěžek | |
| Adherentní buněčné linie mají za následek nižší výtěžek. | Suspenzní buněčné linie vedou k vyššímu výtěžku. |
Shrnutí – Adherent vs. Suspension Cell Lines
Udržování buněčných linií je důležitým procesem při kultivaci buněk pro živočišné buněčné kultury i pro rostlinné tkáňové kultury. Kromě toho jsou také udržovány buněčné linie pro mikrobiální buňky, které jsou široce používány v průmyslových procesech. Buněčné linie mohou být buď označovány jako adherentní buněčné linie nebo suspenzní buněčné linie. Adherentní buněčné linie jsou odvozeny z adherentních primárních buněčných kultur a jsou závislé na ukotvení. Suspenzní buněčné linie jsou odvozeny ze suspenzních primárních buněčných kultur. Tyto buňky existují v tekutém médiu a pro růst buněk je vyžadováno nepřetržité promíchávání buněk. To je rozdíl mezi adherentními buněčnými liniemi a suspenzními buněčnými liniemi.
