Klíčový rozdíl mezi Giemsovým barvením a Leishmanovým barvením je v tom, že Giemsovo barvení je užitečné při barvení oblastí DNA různých chromozomů ke zkoumání různých aberací, jako jsou translokace a přeuspořádání, zatímco Leishmanovo barvení je užitečné při barvení a analýze krevního nátěru k rozlišení a identifikaci trypanozomů, leukocytů a parazitů malárie.
Barvení je zásadním krokem při zlepšování kontrastu mikroskopického obrazu v kontextu mikroskopie, zejména pro zvýraznění různých struktur v biologických buňkách a tkáních. Mořidlo Giemsa a mořidlo Leishman patří do skupiny mořidel Romanowsky, kam patří také mořidlo Wright a mořidlo Jenner. Běžně jsou Romanowsky skvrny užitečné při barvení krevních nátěrů. Toho využíváme především při studiu morfologie červených krvinek a provádění diferenciálních počtů bílých krvinek. Eosin Y a azurová B barviva jsou běžnými složkami lazur Romanowsky. Postupy barvení podle Romanowského pomáhají při diagnostice různých chorobných stavů, jako je leukémie.
Co je to Giemsa Stain?
Giemsovo barvení obvykle pomáhá rozlišit mezi cytoplazmatickou a jadernou morfologií krevních buněk, jako jsou bílé krvinky, červené krvinky a krevní destičky. Pomáhá také rozlišovat parazity. Používá se především pro cytogenetiku a diagnostiku malárie a dalších parazitárních onemocnění. Kromě toho je barvivo Giemsa specifické pro fosfátové skupiny, které jsou přítomny v DNA. Přilnou k oblastem, kde je ve řetězci DNA vyšší počet vazeb adenin-thymin.
Obrázek 01: Giemsa Stain
Dále je Giemsovo barvení také užitečné při Giemsově pruhování nebo G pruhování k barvení chromozomů a ke generování karyogramů. Proto má Giemsovo barvení schopnost identifikovat a vizualizovat různé abnormality v chromozomech. Například trofozoit Trichomonas vaginalis, který vydává nazelenalý výtok a sestává z pohyblivých buněk na vlhkých preparátech, je obarven Giemsovým barvivem. Jak bylo uvedeno výše, barvivo Giemsa působí jako typická skvrna na krevním filmu. Při obarvení se červené krvinky zbarví růžově, krevní destičky světle nebo světle růžově a cytoplazma lymfocytů, monocytů a leukocytů se zbarví nebesky modře, bledě modře a purpurově.
Giemsa mořidlo je směs eosinu, methylenové modři a Azure B. Směs methylenového azuru, která spolu s methylenovou modří tvoří eosinát, tuto směs stabilizuje. Při procesu Giemsova barvení se nejprve na mikroskopické sklíčko umístí tenký film vzorku. Dalším krokem je fixace čistým metanolem po dobu asi 30 sekund přidáním několika kapek metanolu na sklíčko. Poté se sklíčko ponoří do 5% roztoku barviva Giemsa na dobu asi 20-30 minut. Posledním krokem je omytí sklíčka vodou z vodovodu a ponechání uschnout.
Co je Leishman Stain?
Skotský patolog William Boog Leishman je vývojářem Leishmanovy skvrny. Je to jedna z lazur, která patří do skupiny lazur Romanowsky. Navíc se častěji využívá při diferenciaci a identifikaci různých malarických parazitů, trypanosomů – jednobuněčných bičíkovitých prvoků, což jsou paraziti a leukocyty.
Obrázek 02: Leishman Stain
Základem mořidla Leishman je methanolová směs, která obsahuje směs methylenové modři, která je ‚polychromovaná‘; demethylovány na různé typy azurů a eosinu. Vzhledem ke stabilitě zásobního roztoku methanolické směsi jej můžeme použít přímo do fixace stěru, přičemž odpadá prefixace. Stabilita se snižuje, pokud je roztok smíchán s vodným pufrem. Při provádění diferenciálního počítání buněk poskytuje Leishmanovo barvení charakteristickou jasně fialovou barvu jádra a neutrofilních granulí. Zvyšuje tak diferenciaci mezi jádrem a cytoplazmou. Barvivo Leishman také poskytuje kvalitnější kontrastní vybarvení ve srovnání s jinými mořidly na bázi methylenové modři a eosinu.
Vzhledem k tomu, že různé cytoplazmatické komponenty jsou pro diferenciaci a identifikaci ostře řešeny, hematologové preferují Leishmanovo barvení ve srovnání s jinými Romanowskyho barveními. Při detekci malarických parazitů jsou postupy barvení podle Leishmana citlivější a přesnější než jiná barvení, jako je Fieldovo barvení.
Jaké jsou podobnosti mezi Giemsa Stain a Leishman Stain?
- Giemsa skvrna a barva Leishman jsou rozdílná barviva.
- Oba jsou užitečné při provádění diferenciálních počtů bílých krvinek a studiu buněčné morfologie červených krvinek.
- Navíc obě skvrny patří do skupiny skvrn Romanowsky.
Jaký je rozdíl mezi Giemsa Stain a Leishman Stain?
Giemsa barvení je užitečné při barvení oblastí DNA různých chromozomů ke zkoumání různých aberací, jako jsou translokace a přeuspořádání, zatímco Leishmanovo barvení je užitečné při barvení krve k rozlišení a identifikaci trypanozomů, leukocytů a parazitů malárie. Toto je klíčový rozdíl mezi barvivem Giemsa a barvivem Leishman.
Bakterolog Gustav Giemsa navíc vyvinul techniku barvení Giemsa, zatímco patolog William Boog Leishman vyvinul techniku barvení podle Leishmana. Dalším významným rozdílem mezi mořidlem Giemsa a mořidlem Leishman je složení mořidla. Barvivo Giemsa je směs eosinu, methylenové modři a Azure B, zatímco barvivo Leishman je methanolová směs, která obsahuje směs methylenové modři.
Shrnutí – Giemsa Stain vs Leishman Stain
V kontextu mikroskopie hrají techniky barvení hlavní roli při zvyšování kontrastu mikroskopických snímků různých biologických tkání. Barvení Giemsa je užitečné při barvení oblastí DNA různých chromozomů ke zkoumání různých aberací, jako jsou translokace a přeuspořádání. Leishmanovo barvení je užitečné při barvení a analýze krevního nátěru k rozlišení a identifikaci trypanozomů, leukocytů a parazitů malárie. Takže toto je rozdíl mezi Giemsovým a Leishmanovým barvivem.
