Klíčový rozdíl mezi CLIA a ECLIA je v tom, že CLIA používá chemickou metodu pro generování chemiluminiscence, zatímco ECLIA používá elektrochemickou metodu pro generování chemiluminiscenčních signálů v technice imunotestů.
Imunotesty se široce používají při identifikaci a kvantifikaci proteinů spojených s nemocemi nebo infekcemi. Proto primárně spoléhají na koncept vazby protilátka-antigen. Existuje mnoho typů imunotestů a chemiluminiscenční imunotesty jsou jednou z takových nově vznikajících vývojových technik. CLIA i ECLIA používají chemiluminiscenční indikátory.
Co je CLIA?
Chemiluminiscenční imunotest (CLIA) je typ imunotestu, který k detekci využívá luminiscenční molekulu. Luminiscence emitovaná molekulou je detekována na spektrofotometru, obecně při vlnové délce mezi 300 – 800 nm. Chemiluminiscence způsobuje excitaci atomů a tato technika identifikuje exergonické chemické reakce jako nejvhodnější zdroj energie k vyvolání excitace.
Technika CLIA probíhá ve dvou hlavních metodách jako přímá technika CLIA a nepřímá technika CLIA. Přímá technika CLIA využívá přímé luminoforové markery, které jsou navázány na cíl, zatímco nepřímá metoda CLIA využívá enzymatické markery. Mezi přímé luminoforové markery patří acidum a ruthenium estery, zatímco nepřímé markery zahrnují alkalickou fosfatázu se substrátem adamantyl 1,2-dioxetanarylfosfát (AMPPD) a křenovou peroxidázu s luminolem nebo jeho deriváty jako substrátem.
Obrázek 01: Chemiluminiscence
Klíčovými výhodami CLIA je široký dynamický rozsah funkčnosti, vysoká intenzita přenosu signálu, absence interference pozadí, vysoká specificita, rychlost, stabilita a kompatibilita s různými protokoly stanovení. Naproti tomu jejich vysoká cena a omezení s ohledem na detekci antigenu a testovací panely jsou nevýhodami CLIA.
Co je ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) je nová technika vývoje imunoanalýzy, která využívá koncept elektrochemiluminiscence. V konceptu elektroluminiscence se meziprodukty generují elektrochemicky. Tyto elektronicky generované meziprodukty pak dosáhnou excitovaného stavu a vedou k emisi světla. Vlnová délka, ve které je světlo vyzařováno, odpovídá energetické mezeře. Chemiluminiscence je tedy vytvářena díky tomu, že jedna nebo více reaktantů se vytváří elektrochemicky na elektrodě.
ECLIA je užitečná analytická aplikace s vysokou citlivostí a specificitou. Používá se hlavně při identifikaci proteinů souvisejících s různými patologickými a zdravotními stavy. Mezi jeho klíčové přednosti patří širší dynamický rozsah, všestrannost, prostorové a časové řízení aplikací elektrodových potenciálů, vysoká citlivost až pikomolární rozsahy. Nevýhodou však je, že vyžaduje odbornou manipulaci a vysoké náklady.
Jaké jsou podobnosti mezi CLIA a ECLIA?
- Obě techniky spoléhají na koncept vazby antigen-protilátka.
- Obojí se navíc používá hlavně pro diagnostiku onemocnění založenou na kvantifikaci bílkovin.
- Obě jsou citlivé a specifické metody soupravy.
- Pro detekci používají koncept chemiluminiscence.
- Mohou být automatizovány.
- Oba vyžadují k detekci spektrofotometr.
- Oba mají široký dynamický rozsah.
- Jsou to nákladné techniky.
Jaký je rozdíl mezi CLIA a ECLIA?
CLIA je technika imunoanalýzy, která využívá teorii chemiluminiscence, zatímco ECLIA je technika imunoanalýzy, která využívá teorii elektrochemie spojenou s chemiluminiscencí. Toto je klíčový rozdíl mezi CLIA a ECLIA. Proto CLIA používá chemické reakce, které vedou k vývoji chemiluminiscenčních signálů, zatímco ECLIA využívá elektrochemické reakce, které vedou k vývoji chemiluminiscenčních signálů.
Níže uvedená infografika rozdílu mezi CLIA a ECLIA ukazuje více srovnání obou technik.
Shrnutí – CLIA vs. ECLIA
CLIA a ECLIA jsou techniky, které hrají důležitou roli v diagnostice onemocnění. Jsou to pokročilé metody imunodiagnostiky založené na konceptu vazby protilátka-antigen. Klíčovým rozdílem mezi CLIA a ECLIA je metoda generování chemiluminiscence. Zatímco CLIA využívá chemické reakce ke generování chemiluminiscence po vazbě protilátka-antigen, ECLIA využívá elektrochemické reakce k generování chemiluminiscence. Obě techniky jsou však rychlé a specifické.
