Klíčový rozdíl mezi rychlostní zónovou a izopyknickou centrifugací je v tom, že rychlostní zónová centrifugace je důležitá pro separaci částic, které se liší velikostí, ale ne svou hustotou, zatímco izopyknická centrifugace je důležitá pro separaci částic, které se liší hustotou, ale ne svou velikost.
Centrifugace je analytická technika, kterou můžeme použít k separaci částic v roztoku na základě velikosti, tvaru, hustoty, viskozity atd. média. Zde potřebujeme umístit roztok obsahující suspendované částice do odstředivé trubice a poté trubici vložit do rotoru, aby se otáčel definovanou rychlostí tak, aby se částice oddělily od roztoku.
Co je rychlostní zonální centrifugace?
Rychlostní zonální centrifugace je analytická technika, kterou můžeme použít k separaci částic roztoku v závislosti na velikosti, ale ne na hustotě. Jinými slovy, tato technika odděluje částice z roztoku na základě velikosti, ale nebere v úvahu rozdíly v hustotě částic. Proto je tato technika velmi užitečná při separaci buněčných organel, jako jsou endozomy. Navíc jej můžeme použít i k separaci proteinů.
Obrázek 01: Stolní centrifuga
Toto odstřeďování je navíc závislé na čase. To znamená, že poloha vzorku se vztahuje k době sedimentace. Gradient, který touto metodou získáme, je plochý a maximální hustota tohoto gradientu nikdy nepřekročí hustotu maximálně husté částice v peletě.
Co je to izopyknická centrifugace?
Izopyknická centrifugace je analytická technika, kterou můžeme použít k separaci částic roztoku v závislosti na hustotě, ale ne na velikosti. To znamená; částice v roztoku můžeme oddělit, pokud se od sebe liší svou hustotou. Pokud se liší velikostí místo hustoty, pak tato technika není pro tuto separaci vhodná. Velikost částic ovlivňuje pouze rychlost migrace částic. Proto je tato technika nezávislá na čase.
Obrázek 02: Gradient hustoty daný centrifugací
Důležitější je, že tuto techniku můžeme použít k separaci nukleových kyselin v gradientu. Gradient daný izopyknickou centrifugací je strmý. Navíc nevytváří pelety, protože separace je založena na vztlakových hustotách částic.
Jaký je rozdíl mezi rychlostní zonální a izopyknickou centrifugací?
Klíčový rozdíl mezi rychlostní zónovou a izopyknickou centrifugací je v tom, že rychlostní zónová centrifugace je důležitá pro separaci částic, které se liší velikostí, ale ne svou hustotou, zatímco izopyknická centrifugace je důležitá pro separaci částic, které se liší hustotou, ale ne v jejich velikosti.
Dalším významným rozdílem mezi rychlostní zónovou a izopyknickou centrifugací je navíc to, že rychlostní zónová centrifugace je závislá na čase, zatímco izopyknická centrifugace je nezávislá na čase. Kromě toho je gradient daný rychlostní zónovou centrifugací plochý, zatímco u izopyknické centrifugace je strmý.
Shrnutí – Míra zonální vs. izopyknická centrifugace
Odstřeďování je důležitou analytickou technikou. Existují dvě formy centrifugace, které používáme v biologických aplikacích: rychlostní zonální a isopyknická centrifugace. Klíčový rozdíl mezi rychlostní zónovou a izopyknickou centrifugací je v tom, že rychlostní zónová centrifugace je důležitá pro separaci částic, které se liší velikostí, ale ne svou hustotou, zatímco izopyknická centrifugace je důležitá pro separaci částic, které se liší hustotou, ale ne svou velikostí.
