Klíčový rozdíl mezi gelovou a papírovou elektroforézou je v tom, že separačním médiem při gelové elektroforéze je agarózový gel, zatímco separačním médiem při papírové elektroforéze je papírový proužek ponořený do roztoku pufru.
Elektroforéza je analytická technika, která je užitečná pro analýzu vzorku pomocí elektrických vlastností chemických látek přítomných v daném vzorku. Zde můžeme pozorovat pohyb dispergované látky v analyzovaném médiu. Proto můžeme určit pohyb chemického druhu vzhledem k médiu. Gelová elektroforéza a papírová elektroforéza jsou dvě důležité techniky v chemii.
Co je gelová elektroforéza?
Gelovou elektroforézu lze popsat jako metodu separace a analýzy makromolekul v závislosti na velikosti a náboji. Makromolekuly v tomto kontextu mohou označovat DNA, RNA, proteiny a jejich fragmenty. Tato metoda je užitečná v klinické chemii pro separaci proteinů podle náboje nebo velikosti. Kromě toho je v biochemii a molekulární biologii důležité pro separaci smíšené populace fragmentů DNA a RNA podle jejich délky odhadnout velikost fragmentů DNA a RNA. Kromě toho jej můžeme použít k oddělení proteinů podle jejich náboje.
Obrázek 01: Přístrojové vybavení gelové elektroforézy
Můžeme oddělit molekuly nukleové kyseliny aplikací elektrického pole pro pohyb záporně nabitých molekul skrz matrici agarózy nebo jiných látek. V tomto procesu se kratší molekuly mohou pohybovat rychleji, zatímco delší molekuly se pohybují pomaleji. Je to proto, že kratší molekuly se mohou snadno pohybovat póry gelu. Tento pohyb úlomků póry nazýváme „prosévání“. Navíc z této metody obvykle nemůžeme oddělit proteiny podle jejich velikosti, protože proteiny jsou příliš velké na to, aby se daly sít z pórů gelu. Tento proces však můžeme použít k separaci nanočástic.
Co je papírová elektroforéza?
Papírovou elektroforézu lze popsat jako separaci s použitím úlomků filtračního papíru namočeného v tlumivém roztoku. Obecně používáme jako tlumivý roztok kyselinu diethylbarbiturovou a kyselinu barbiturovou rozpuštěnou v alkálii. Hodnota pH tohoto pufrovacího roztoku je pH 8,6. Navíc můžeme na papír umístit malé množství séra, kterým pak několik hodin prochází stejnosměrný proud.
Papírová elektroforéza je důležitá pro separaci malých, nabitých molekul, včetně aminokyselin a malých proteinů. Zde potřebujeme navlhčit proužek filtračního papíru pufrem a ponořit konce proužku do pufrovacích zásobníků, které obsahují elektrody. První člověk, který tuto metodu použil, byl Konig v roce 1937. Ve svých zjištěních zavedl papírem napuštěný pufr pro zónovou elektroforézu a také navrhl UV detekci.
Jaký je rozdíl mezi gelovou a papírovou elektroforézou?
Elektroforéza je analytická technika, která je užitečná pro analýzu vzorku pomocí elektrických vlastností chemických látek přítomných v daném vzorku. Gelová elektroforéza a papírová elektroforéza jsou dvě důležité metody elektroforézy. Klíčový rozdíl mezi gelovou a papírovou elektroforézou je v tom, že separačním médiem při gelové elektroforéze je agarózový gel, zatímco separačním médiem při papírové elektroforéze je papírový proužek ponořený do roztoku pufru.
Níže je shrnutí rozdílů mezi gelovou a papírovou elektroforézou ve formě tabulky pro srovnání vedle sebe.
Shrnutí – gelová vs papírová elektroforéza
Gelová elektroforéza je metoda separace a analýzy makromolekul v závislosti na velikosti a náboji, zatímco papírová elektroforéza je separace pomocí filtračního papíru namočeného v tlumivém roztoku. Klíčový rozdíl mezi gelovou a papírovou elektroforézou je v tom, že separačním médiem při gelové elektroforéze je agarózový gel, zatímco separačním médiem při papírové elektroforéze je papírový proužek ponořený do roztoku pufru.
