Klíčový rozdíl mezi izolací DNA a RNA je v tom, že izolace DNA je postup, při kterém je z biologické buňky extrahován typ nukleové kyseliny nazývaný DNA, zatímco izolace RNA je postup, při kterém je typ nukleové kyseliny nazývaný RNA extrahováno z biologické buňky.
Izolace nukleových kyselin je výchozím bodem v široké řadě následných aplikací. Vysoká kvalita nukleových kyselin ve výchozích vzorcích je klíčovým faktorem pro úspěch následných následných aplikací. Izolace nukleové kyseliny by mohla být definována jako série kroků k získání nukleové kyseliny ve vzorku čistoty, který může být použit pro různé následné aplikační kroky. Účelem extrakce nukleových kyselin je dezintegrovat buněčnou membránu a dosáhnout maximální eliminace lipidů a proteinů pro získání čistých nukleových kyselin, jako je DNA nebo RNA.
Co je izolace DNA?
Izolace DNA je rutinní postup, při kterém je z biologické buňky extrahován typ nukleové kyseliny nazývaný DNA. Izolace DNA se provádí extrakcí DNA z krve, zmrazených vzorků tkáně a bloků parafinové tkáně. Existují tři hlavní kroky v izolaci DNA, včetně buněčné lýzy, extrakce DNA a precipitace. Při buněčné lýze se buňky ve vzorku od sebe často oddělí fyzikálními prostředky, jako je mletí nebo vortexování, a vloží se do roztoku obsahujícího sůl. Obvykle kladně nabité ionty sodíku v soli pomáhají chránit záporně nabité fosfátové skupiny, které probíhají podél páteře DNA. Později se přidá detergent, který rozloží lipidy v buněčné membráně a jádrech, které při narušení těchto membrán uvolňují DNA.
Obrázek 01: Izolace DNA
Extrakce DNA se provádí za účelem získání čistého vzorku DNA. K degradaci proteinů spojených s DNA a dalších buněčných proteinů se často přidává enzym proteáza. Kromě toho mohou být některé buněčné zbytky odstraněny filtrací vzorku. Nakonec se DNA vysráží pomocí alkoholu. Kromě toho, pokud je zde mnoho DNA, lze na konci postupu pozorovat štiplavou bílou sraženinu.
Co je izolace RNA?
Izolace RNA je postup, při kterém je z biologické buňky extrahován typ nukleové kyseliny nazývaný RNA. Tento postup je často komplikován přítomností ribonukleázových enzymů v buňkách a tkáních, které degradují RNA. V molekulární biologii se používá několik metod k izolaci RNA ze vzorků, jako je extrakce guanidinium-thiokyanátem-fenol-chloroformem.
Obrázek 02: Izolace RNA
Izolace RNA se obvykle skládá z několika kroků, včetně buněčné lýzy a homogenizace, zhášení biochemických procesů, dělení nukleové kyseliny, získávání RNA, surové purifikace a hodnocení kvality RNA. Metoda lýzy a eluce na bázi filtračního papíru má vysokou kapacitu při extrakci RNA. Navíc extrakce RNA v kapalném dusíku pomocí hmoždíře a tloučku je také velmi užitečná metoda, protože zabraňuje aktivitě ribonukleázy.
Jaké jsou podobnosti mezi izolací DNA a RNA?
- Izolace DNA a RNA jsou dva typy postupů izolace nukleových kyselin.
- Oba postupy mají podobné základní kroky, jako je lýza buněk, extrakce a purifikace.
- Tyto postupy izolují důležité typy nukleových kyselin, které mají řadu následných aplikací.
- Provádějí se v laboratorních podmínkách.
- Lze je provádět pomocí vyrobených sad.
Jaký je rozdíl mezi izolací DNA a RNA?
Při izolaci DNA je z biologické buňky extrahován typ nukleové kyseliny nazývaný DNA, zatímco při izolaci RNA je z biologické buňky extrahován typ nukleové kyseliny nazývaný RNA. Toto je klíčový rozdíl mezi izolací DNA a RNA. Kromě toho se izolace DNA normálně provádí při pH přibližně 7 až 8, zatímco izolace RNA se normálně provádí při pH přibližně 4,5.
Níže uvedená infografika představuje rozdíly mezi izolací DNA a RNA ve formě tabulky pro srovnání vedle sebe.
Shrnutí – DNA vs izolace RNA
Izolace DNA a RNA jsou dva typy postupů izolace nukleových kyselin. Izolace DNA je postup, během kterého je DNA extrahována z biologické buňky. Izolace RNA je postup, během kterého je RNA extrahována z biologické buňky. Toto je klíčový rozdíl mezi izolací DNA a RNA.
