Klíčový rozdíl mezi chromozomovým pruhováním a chromozomovým malováním je v tom, že chromozomové pruhování je technika barvení, která zobrazuje oblasti chromozomů v rozlišitelných tmavých a světlých proužcích, ale malování chromozomů je hybridizační technika, ve které jsou specifické oblasti nebo segmenty chromozomů natřeno sekvenčně specifickými fluorescenčně značenými sondami.
V cytogenetice je nutné vytvořit viditelný karyotyp organismu, aby bylo možné identifikovat chromozomy a jejich aberace. Páskování chromozomů a malování chromozomů jsou dvě cytogenetické techniky, které pomáhají při vizualizaci chromozomů. Obě techniky jsou užitečné při identifikaci genetických poruch.
Co je to chromozomální pruhování?
Chromosom banding je technika barvení, která zobrazuje střídající se světlé a tmavé pruhy nebo oblasti po délce chromozomu. Proužek označuje část chromozomu, která je jasně odlišitelná od sousedních segmentů tím, že se jeví tmavší nebo světlejší. Aby se vytvořily tmavé a světlé pruhy, je nutné obarvit chromozomy pomocí vhodného barviva, jako je fluorescenční barvivo chinakrin nebo barvivo Giemsa.
Existuje několik typů technik chromozomálních pruhů. Mezi nimi Q-banding, Reverse (R) banding a G-banding jsou zobecněné techniky páskování. Technika G páskování používá barvení zvané Giemsovo barvení a barví oblasti bohaté na AT heterochromatických oblastí v tmavě zbarvených pásech a euchromatické oblasti bohaté na GC ve světle obarvených pásech. Pásování R je opakem pásování G a barví oblasti bohaté na GC v tmavých pásech a oblasti bohaté na AT ve světlých pásech. Q páskování na druhé straně využívá fluorescenční barvivo chinakrin a barví chromozomy ve žluté fluorescenci různé intenzity. C banding technika je další bandážovací technika, která barví oblasti centromery. Technika T banding navíc vizualizuje oblasti telomer.
Obrázek 01: Chromozomové pruhování
Vzor pruhování je pro organismy jedinečný. Proto jsou tyto jedinečné vzory pruhování důležité při identifikaci chromozomů a detekci chromozomálních aberací (zlomení chromozomů, ztráta, duplikace, translokace nebo invertované segmenty).
Co je malování chromozomů?
Malování chromozomů je technika, při které jsou specifické oblasti nebo segmenty chromozomů natřeny sekvenčně specifickými sondami, které jsou fluorescenčně označeny. Proto je chromozomální malba vždy spojena s in situ technikou FISH. Je zcela založen na molekulární hybridizaci se sekvenčně specifickými sondami na chromozomech. Proto potřebuje specifické sondy, aby hybridizoval cílové chromozomy nebo oblasti chromozomů.
Obrázek 02: Chromozomální malba
Tato technika navíc zpočátku vyžaduje denaturaci cílové chromozomální DNA, která je v metafázi. Za druhé, krok hybridizace probíhá se sondami. Jakmile sondy najdou své komplementární sekvence, hybridizují se specifickými oblastmi chromozomu. Hybridizovaná místa můžeme snadno pozorovat pomocí autoradiografie nebo imunofluorescence. Příprava sond, denaturace, hybridizace a vizualizace jsou čtyři hlavní kroky zahrnuté v chromozomální malbě.
Pokud jde o aplikace, chromozomální malování je užitečné při identifikaci chromozomálních přeuspořádání, bodů zlomu a při určování extrachromozomálních materiálů. Navíc je to mocný nástroj v přesné lokalizaci různých genových sekvencí chromozomů na mikroskopické úrovni. Kromě toho je malování chromozomů užitečné při identifikaci genů pro požadované znaky v chromozomech.
Jaké jsou podobnosti mezi chromozomovým pruhováním a chromozomovým malováním?
- Chromosom banding a chromozom painting jsou dvě techniky používané v cytogenetické analýze.
- Obě techniky vizualizují chromozomy obvykle v metafázi.
- Tyto techniky mohou identifikovat normální chromozomy a aberace.
- Navíc jsou tyto techniky opravdu užitečné při identifikaci genetických poruch.
Jaký je rozdíl mezi chromozomovým pruhováním a chromozomovým malováním?
Chromosom banding je technika barvení, která zobrazuje části chromozomů v tmavých a světlých proužcích, které jsou rozlišitelné. Mezitím je malování chromozomů hybridizační technikou, která maluje specifické oblasti chromozomů se sekvenčně specifickými sondami, které jsou fluorescenčně značené. Toto je klíčový rozdíl mezi chromozomovým pruhováním a chromozomovým malováním. Kromě toho, chromozomové pruhování vytváří střídající se tmavé a světlé pruhy podél délky chromozomu, zatímco chromozomové malování vytváří fluorescenčně označené oblasti chromozomů.
Proužkování chromozomů navíc závisí na schopnosti chromozomální DNA obarvit se barvivem, zatímco malování chromozomů závisí na molekulární hybridizaci se sekvenčně specifickými sondami na chromozomech. To je důležitý rozdíl mezi chromozomovým pruhováním a chromozomovým malováním. Kromě toho, na rozdíl od páskování chromozomů, technika malování chromozomů vyžaduje sekvenčně specifické fluorescenčně značené sondy.
Shrnutí – Chromosom Banding vs. Chromozom Painting
Chromosom banding a chromozom painting jsou dvě techniky používané k vizualizaci chromozomů, obvykle v metafázi. Obě techniky pomáhají identifikovat numerické a strukturální chromozomální aberace a genetická onemocnění. Chromosom banding je technika barvení, která zobrazuje specifické oblasti chromozomů v tmavých a světlých proužcích, které jsou rozlišitelné. Mezitím je chromozomální malování typem hybridizační techniky, která vizualizuje specifické oblasti chromozomů díky hybridizaci s fluorescenčně značenými sekvenčně specifickými sondami. Toto je klíčový rozdíl mezi chromozomovým pruhováním a malováním chromozomů.
